检索历史 清除

摘要目的：研究低雄激素状态是否促进阴茎海绵体组织细胞焦亡抑制大鼠勃起功能。<br>　　方法：36只8周龄健康雄性SD大鼠随机分为6组（n=6）：假手术组（4w/8w sham）、去势组（4w/8w cast）、睾酮替代组（4w/8w cast+T）。睾酮替代组的大鼠每隔一天于皮下注射丙酸睾酮，其余大鼠注射相同体积植物油。模型建立4、8周后，测定阴茎海绵体最大内压/平均动脉压（ICPmax/MAP）、血清T、阴茎海绵体组织一氧化氮（NO）和白介素1β（IL-1β）的含量；IHC检测NACHT-LRR-PYD结构域蛋白3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1、Gasdermin-D（GSDMD）在阴茎海绵体中定位表达情况；马松染色测定阴茎海绵体组织纤维化情况；Western blotting检测NLRP3、ASC、Caspase-1p20、GSDMD-N、转化生长因子β1（TGF-β1）、胶原蛋白1（collagen-Ⅰ）和胶原蛋白3（collagen-Ⅲ）表达情况；Flow cytometry检测阴茎海绵体组织单细胞悬液中焦亡细胞所占比例。<br>　　结果：大鼠ICPmax/MAP在去势组（3V:4w cast:0.37±0.03;8w cast:0.28±0.02;5V:4w cast:0.45±0.03;8w cast:0.34±0.03）较对应假手术组（3V:4w sham:0.63±0.04;8w sham:0.62±0.03;5V:4w sham:0.73±0.03;8w sham:0.71±0.02）和睾酮替代组（3V:4w cast+T:0.60±0.02;8w cast+T:0.60±0.03;5V:4w cast+T:0.72±0.03;8w cast+T:0.70±0.02）显著降低（P＜0.01），8周去势组较4周去势组显著降低（P＜0.01）。大鼠血清T、阴茎海绵体组织SM/C和NO含量在去势组（4w cast:1.49±0.10nmol/L;6.86±0.84%;10.52±2.25umol/gprot;8w cast:0.47±0.05nmol/L;3.90±0.90%;6.68±1.40umol/gprot）较对应假手术组（4w sham:21.24±2.19nmol/L;15.52±1.65%;17.82±1.54umol/gprot;8w sham:20.70±2.16nmol/L;16.33±1.45%;18.52±1.58umol/gprot）和睾酮替代组（4w cast+T:21.19±2.54nmol/L;16.26±1.34%;16.78±1.67umol/gprot;8w cast+T:21.36±1.97nmol/L;15.67±1.84%;16.64±2.16umol/gprot）显著降低（P＜0.01），8周去势组较4周去势组显著降低（P＜0.05）。免疫组化结果显示NLRP3、ASC、Caspase-1和GSDMD主要表达于大鼠阴茎海绵体组织平滑肌细胞与内皮细胞胞浆中，且去势大鼠的蛋白表达较对应的假手术和睾酮替代大鼠显著增加（P＜0.01），8周去势大鼠较4周去势大鼠显著增加（P＜0.05）。Western blotting显示去势大鼠的阴茎海绵体组织中NLRP3、ASC、Caspase-1p20、GSDMD-N、TGF-β1、collagen-Ⅰ和collagen-Ⅲ表达较对应假手术和睾酮替代大鼠显著增加（P＜0.01），8周去势大鼠较4周去势大鼠显著增加（P＜0.01）。Elisa结果显示大鼠阴茎海绵体组织IL-1β表达在4、8周去势组（276.9±14.22pg/ml;332.6±8.89pg/ml）较对应假手术组（196.3±23.49pg/ml;198.1±22.47pg/ml）、睾酮替代组（194.1±18.83pg/ml;195.8±15.95pg/ml）显著增加（P＜0.01），8周去势组较4周去势组显著增加（P＜0.05）。Flow cytometry结果显示大鼠阴茎海绵体组织单细胞悬液中焦亡细胞所占比例在4、8周去势组（9.18±2.10%；15.26±4.21%）较对应假手术组（3.67±1.78%；3.86±2.00%）、睾酮替代组（4.31±1.73%；4.37±1.95%）显著增加（P＜0.05），8周去势组较4周去势组显著增加（P＜0.05）。<br>　　结论：低雄激素状态能诱导大鼠阴茎海绵体组织中平滑肌细胞和内皮细胞焦亡，使阴茎海绵体组织纤维化增加、NO生成减少，抑制大鼠的勃起功能。