摘要目的:本研究旨在探讨在皮肤高张力切口中单纯间断缝合、垂直褥式缝合、原位回针垂直褥式缝合三种不同缝合方式对大鼠皮肤瘢痕形成的影响及机制。<br> 方法:(1)选择健康成年的雌性SD大鼠共计18只,麻醉后在背部纵向,切取下5cm×2mm全层皮肤后,随机分为三组分别按以下三种缝合方式进行缝合:单纯间断缝合组SIS,垂直褥式外翻缝合组VMS,原位回针垂直褥式缝合组R-VMS;(2)安装牵拉装置进行机械牵引,每天增加牵拉距离2mm,形成高张力缝合伤口;(3)持续观察大鼠伤口愈合情况,瘢痕生长情况并进行拍照记录;(4)20天后采集各组瘢痕组织样本,行HE染色观察瘢痕组织形态情况,Masson染色统计胶原生成率,评估高张力下不同缝合方式对瘢痕形成的影响;(5)免疫荧光检测Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达;(6)免疫组织化学染色检测肌成纤维细胞标志物α-SMA的表达;(7)RT-qPCR和Westernblot检测TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3的表达情况。<br> 结果:成功建立三种不同缝合方法的高张力切口缝合。在术后第0天、5天、10天、20天的伤口外观观察发现,R-VMS组切口愈合速度明显快于SIS组和VMS组;SIS组和VMS组愈合后可见切口线痕,R-VMS组切口消失,仅可见点状瘢痕样痕迹。HE染色结果显示,SIS组和VMS组瘢痕真皮呈扁平状,胶原纤维呈波浪状,较为致密,R-VMS组真皮表皮较薄,胶原纤维疏松,毛囊、汗腺等正常皮肤附属器比SIS组和VMS组较多。Masson染色结果显示,R-VMS组胶原纤维疏松,胶原纤维数量减少,胶原分数定量结果显示R-VMS组胶原密度显著低于SIS组和VMS组。免疫荧光结果显示,三组的Ⅰ型胶原表达均高于Ⅲ型胶原表达。SIS组和VMS组的Ⅰ型胶原表达量显著高于R-VMS组,Ⅲ型胶原表达量显著低于R-VMS组,SIS组和VMS组之间没有显著差异。免疫组化结果显示,肌成纤维细胞标志物α-SMA在R-VMS组中的表达比SIS组和VMS组低。RT-qPCR和WesternBlot结果显示,TGFβ1在R-VMS组中的表达低于SIS组和VMS组,TGFβ2和TGFβ3表达在三组中没有明显变化。<br> 结论:在高张力切口中,相比于单纯间断缝合法和垂直褥式外翻缝合法,原位回针垂直褥式缝合法可通过减少胶原形成、肌成纤维细胞表达、TGFβ1表达,从而减轻瘢痕。
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