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摘要恶性肿瘤由于其较低的治愈率，已经成为危害人类生命健康最主要的疾病之一，目前，临床上常规的治疗手段并不能达到理想的癌症治疗效果。纳米材料因其独特的电学、光学、磁学和热学等性质受到了广泛关注，由于可以同时实现癌症的精准诊断以及药物在肿瘤部位精准并持续的递送，因而在生物学领域中具有较大的应用潜力，为肿瘤的治疗带来了新的机会，被广泛应用于肿瘤治疗的研究中。而纳米载体的递送效率和治疗效果与其在体内的命运是密切相关的，如体内生物分布、药物的释放行为以及药代动力学等，因此研究纳米载体的体内命运也是在开发纳米载体的过程中必不可少的一部分。<br>　　将化疗药包裹于纳米载体中进行抗肿瘤治疗已经成为当前的研究热点，然而单一治疗手段往往并不能取得理想的抑瘤效果，因此开展合理的联合治疗来提升抗肿瘤效果，甚至抑制肿瘤复发和转移是非常必要的。免疫检查点抑制剂已经成为临床的研究热点，为了发挥更好的治疗效果常常与其他疗法进行联合应用。临床上已经开展了大量的免疫治疗剂与化学疗法联合治疗的研究，展现出比任何一种单一治疗手段均明显增强的治疗功效。然而临床上针对化疗药与免疫制剂联用时，使用哪种联合治疗方法最合适，研究较少，目前暂无定论。药物的暴露行为对药物在体内发挥药效作用具有重要意义，这必然会影响联合治疗的效果。<br>　　在本研究中，我们首先通过将极高浓度的维生素E（VE）封装到由磷脂形成的纳米颗粒中，开发了一种安全、简单且高度还原的生物相容性纳米系统，包载多西他赛（DTX）后制备得到还原型冻干多西他赛脂质微球（DTX-VNS）。该纳米系统表现出对DTX的高封装能力，在4℃条件下能稳定放置至少12个月，并显著降低了DTX引起的骨髓抑制、神经毒性和溶血等化疗毒副作用，具有较高的生物安全性。与临床上DTX制剂（Taxotere）相比，多次静脉注射DTX-VNS后，小鼠可耐受的DTX总剂量也提高至少2倍。有趣的是，通过F?rster共振能量转移（FRET）方法研究载体在体内外的命运，发现我们的纳米载体可以在肿瘤细胞内选择性地释放药物，并比在正常器官更快。可能的解释是，肿瘤细胞中的活性氧（ROS）水平高于正常细胞，导致还原型纳米系统结构在肿瘤细胞中能更快被破坏，从而释放药物。过度的氧化应激总是与化疗的严重副作用相关，我们的高度还原的纳米系统显著缓解了细胞的氧化应激并减少了细胞内ROS的积累，因而副作用大幅度减少。与Taxotere相比，DTX-VNS在各种模型中还显示出显著增强的抗肿瘤作用，这是化学疗法和VE介导的免疫抑制微环境缓解协同作用的结果。我们的研究制备了一种高度还原的纳米系统，该系统可以选择性地在肿瘤细胞中释放药物并抑制正常细胞中的氧化应激，从而提高疗效并降低系统毒性，为临床应用提供了有意义的参考。<br>　　接下来，我们将可以在肿瘤细胞中选择性释放药物的DTX-VNS与免疫检查点抑制剂抗PD-1单抗（αPD-1）联合用于恶性肿瘤的治疗。针对纳米粒和αPD-1在肿瘤部位起效行为，我们设计了三种联合治疗方式以实现最大程度的化疗增敏免疫治疗，包括DTX-VNS与αPD-1同时给药，先注射DTX-VNS两天后再注射αPD-1，以及先注射αPD-1两天后再注射DTX-VNS。结果表明在注射DTX-VNS两天后再进行αPD-1注射的方案在多种不同的肿瘤模型中均表现出了最强的抗肿瘤效果，并显著延长了小鼠的生存期。通过质谱流式、多因子检测等手段研究发现，这种治疗方案更能改善肿瘤免疫微环境，导致显著增强的抗肿瘤免疫反应，这可能与该方案能引起最大的治疗叠加效应有关，而这种叠加效应大小主要由DTX-VNS与αPD-1在肿瘤部位的起效行为决定。我们通过分析药物在体内的起效行为探索出了适合我们纳米粒与免疫治疗的最佳联合治疗方案，为临床上化疗与免疫治疗的合理联用提供了有价值的参考。