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DDR1a对实验性结肠炎小鼠Th17/Treg平衡影响的研究

摘要目的:探讨DDR1a(盘状结构域受体1a)对实验性结肠炎小鼠体内Th17/Treg平衡影响及其可能的机制。<br>  方法:实验中选用野生Balb/c小鼠和DDR1a+/-Balb/c小鼠(6-8周龄,20±2g),小鼠共分为4组(每组各7只小鼠):野生小鼠正常对照组(即WT+CON),野生小鼠造模组(即WT+DSS),DDR1a+/-小鼠对照组(即DDR1a+/-+CON),DDR1a+/-小鼠造模组(即DDR1a+/-+DSS)。对照组给予蒸馏水,造模组给予3%DSS溶液自由饮用7天诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,实验过程中记录小鼠每天的活动情况、体重变化、粪便形状、隐血、便血等指标,第8天用5%水合氯醛麻醉小鼠,收集小鼠血液,颈椎脱臼处死后收取结肠、脾脏,提取小鼠血液和脾脏中的单个核细胞,用流式细胞术检测Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,并用RT-PCR检测肠组织中RORγt、Foxp3、IL-17A、IL-10的表达。<br>  结果:(1)DSS造模的野生小鼠和DDR1a+/-小鼠均出现了不同程度的体重下降、稀便、便血等症状,DDR1a+/-DSS组病理评分较WT DSS组明显降低(5.67±0.58vs10.33±0.42,p<0.001);<br>  (2)WT DSS组与WT CON组相比,血液中Th17/CD4+T比例为(1.43±0.14vs0.76±0.10,p<0.01),脾脏中Th17/CD4+T比例为(1.83±0.16vs0.64±0.11,p<0.001);DDR1a+/-DSS组与DDR1a+/-CON组相比,血液中Th17/CD4+T比例为(0.95±0.32vs0.72±0.18,p>0.05),脾脏中Th17/CD4+T比例为(1.10±0.33vs0.92±0.06,p>0.05);<br>  WT DSS组与WT CON组相比,血液中Treg/CD4+T比例为(0.28±0.15vs0.72±0.07,p<0.05),脾脏中Treg/CD4+T比例为(1.03±0.21vs3.24±0.90,p>0.05);DDR1a+/-DSS组与DDR1a+/-CON组相比,血液中Treg/CD4+T比例为(0.26±0.16vs0.24±0.12,p>0.05),脾脏中Treg/CD4+T比例为(3.24±0.61vs4.46±1.37,p>0.05);<br>  (3)DDR1a+/-DSS组小鼠RORγt与WT DSS组小鼠相比(27.69±34.01vs67.75±22.55,p<0.05);DDR1a+/-DSS组小鼠IL-17A与WT DSS组小鼠相比(505.70±249.10vs3541.12±3987.23,p<0.001);DDR1a+/-DSS组小鼠Fxop3与WT DSS组小鼠相比(546.10±722.30vs1170.42±1785.37,p<0.05);DDR1a+/-DSS组小鼠IL-10与WT DSS组小鼠相比(33.70±13.84vs50.76±6.29,p<0.001)。<br>  结论:(1)DDR1a的敲低减轻了DSS诱导的小鼠结肠炎;(2)DDR1a的敲低可能通过影响了Th17/Treg平衡、抑制了炎症细胞因子IL-17A的表达,起到了抗炎作用;(3)DDR1a有可能成为临床治疗UC的一个新靶点。

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