检索历史 清除

摘要目的<br>　　运用针刀对膝关节骨性关节炎兔膝关节处韧带进行干预治疗。观察治疗前后各组兔膝关节软组织形态学变化、韧带病理变化以及韧带中TGF-β1和Smad2、Smad3蛋白含量以及mRNA表达的情况，以此阐明针刀在KOA治疗中对韧带的恢复机制，为针刀治疗KOA组织损伤提供一定的理论依据。<br>　　方法<br>　　选取健康的成年日本大耳白兔40只，雌雄各半，体重（2.25±0.1）kg，据随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组、电针组，每组10只。除空白组，其与各组均进行左后肢伸直位石膏制动造模6周，造模结束次日开始治疗，电针组隔日针刺，一周3次，治疗3周。针刀组，每周1次，治疗3周。治疗结束后统一取材，分别用WesternBlot法以及RT-PCR法检测韧带中TGF-β1、Smad2/3的蛋白含量以及mRNA表达，用HE染色法观察组织中细胞以及纤维的变化。<br>　　结果<br>　　1.兔子的一般情况：造模结束后，动物的LequesneMG评分上升，与空白组相比评分有显著统计学意义（P＜0.01）。造模组动物出现了膝关节的肿胀，关节活动度下降，患肢不能参与正常的行走，不能触底，蹬地等，患肢压痛明显伴随全身反应，挣扎剧烈，造模结束后根据JessicaBadendick大体形态评分标准解剖发现造模成功，符合KOA的表现。<br>　　2.各组韧带中TGF-β1、Smad2/3的蛋白表达<br>　　（1）TGF-β1：与空白组相比，模型组TGF-β1蛋白表达下降，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，电针组和针刀组TGF-β1蛋白表达有不同程度的上升，均有显著差异（P＜0.01）。<br>　　（2）Smad2/3：与空白组相比，模型组Smad2/3蛋白呈现低表达，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，各治疗组Smad2/3蛋白表达有不同程度的上升，差异均有显著统计学意义（P＜0.01）。<br>　　3.各组韧带中TGF-β1、Smad2/3中mRNA的表达<br>　　（1）TGF-β1mRNA：与空白组相比，模型组韧带中TGF-β1mRNA含量明显下降，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，电针组和针刀组韧带中TGF-β1mRNA含量有不同程度的上升，差异均有统计学意义（P＜0.05），其中针刀组与模型组相比差异更为显著（P＜0.01）。另外针刀组与空白组相比，无差异（P＞0.05）。<br>　　（2）Smad2/3mRNA：与空白组相比，模型组韧带中含量降低，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；与模型组相比，针刀组与电针组中Smad2/3mRNA含量都有不同程度的上升，均有显著差异（P＜0.01）。<br>　　4.韧带中纤维与细胞变化：空白组染色完整无脱落，纤维排列整齐有序，分层明显，细胞核细胞质清晰可见且均匀分布于纤维网中。模型组染色出现了大面积的脱落，纤维排列混乱，各层纤维之间混乱交汇，细胞核只有少数部分杂乱的分布于混乱的纤维网中，且分布疏松。针刀组染色呈现小块状分布整齐有序，仅有少部分脱落，纤维的排列整齐有序，可见清楚地分层结构，细胞均匀分布于各小块中，数量较多，排列也紧密，细胞核细胞质均可见。电针组可以较清晰的区分纤维分层，细胞核细胞质分布明显增多但仍有部分排列混乱。<br>　　结论<br>　　1.针刀和电针治疗均可以有效改善膝关节骨性关节炎，使得韧带和软组织的形态发生良性改变，且针刀相比电针组疗效更为显著。<br>　　2.针刀干预兔膝关节骨性关节炎后，韧带中TGF-β1、Smad2/3蛋白表达以及mRNA的含量均发生改变，针刀的治疗机制可能是通过对TGF-β/Smads信号转导通路的调控实现的。