摘要目的<br> 本课题旨在探究黄芪-山楂预防性给药对高脂饮食诱导的大鼠多囊卵巢综合征的影响,研究黄芪-山楂对近年发现的多囊卵巢综合征的主要机理胰岛素抵抗、高雄血症、慢性炎症状态和肥胖等的影响,探讨黄芪-山楂的多靶点作用。从中医角度出发为PCOS的预防提供新的角度。<br> 方法<br> 采用高脂饲料喂养法诱导肥胖多囊卵巢综合征大鼠模型。将3周龄雌性SD大鼠随机分为五组,空白对照组、模型对照组、黄芪组、山楂组和黄芪-山楂对药组,每组10只。除空白对照组大鼠普通饲料喂养外,其余各组高脂饲料(60%kcal)喂养造模;黄芪组给予黄芪水溶液灌胃,山楂组给予山楂水溶液灌胃,黄芪-山楂对药组给予黄芪-山楂水溶液灌胃。药物干预时间为15周。实验过程中每周动态大鼠空腹体重和24h摄食量;从第8周开始,对所有大鼠连续进行3个周期的阴道涂片观察;8周采用酶联免疫吸附法测血清INS、T、IL-6和TNF-α。15周药物干预结束后,取大鼠卵巢、子宫和生殖器周围脂肪,称量其湿重,计算卵巢指数、子宫指数和生殖器周围脂肪指数;取一侧卵巢固定之后观察卵巢组织形态学改变;采用酶联免疫吸附法测血清INS、T、IL-6和TNF-α水平。<br> 结果<br> 1.体重及24h摄食量:各组大鼠之间体重存在明显差异(P=0.000),随着实验时间的增加,空白对照组大鼠体重明显低于模型对照组体重。山楂组大鼠在所有组别中的体重最大,黄芪-山楂在给药各组中的体重最小。大鼠24h摄食量分析随着时间的增加,空白对照组的24h摄食量最大,从第5周之后折线的总体变化趋势来看,山楂组的高脂饲料24h摄食量高于其余高脂饮食组,对药组24h摄食量则低于所有各组大鼠的24h摄食量。<br> 2.动情周期:连续进行3个周期的阴道涂片观察,空白对照组动情周期稳定,细胞发育形态正常;模型对照组动情周期延长至7~8天,且动情周期出现紊乱,细胞形态发育不良;黄芪组和对药组动情周期正常,且各类细胞形态发育正常;山楂组有近一半数量的大鼠出现动情周期延长,较长时间处于动情后期和动情间期等。<br> 3.空腹血清胰岛素:实验时间影响INS的浓度(P<0.05),8周各组大鼠均显著高于15周;而且不同组别间的INS浓度也存在显著差异(P=0.000),8周的大鼠黄芪组和对药组明显低于模型对照组和山楂组,15周的大鼠空白对照组显著低于模型对照组。<br> 4.血清睾酮T水平:8、15周模型对照组均显著高于空白对照组(P<0.05);8周的大鼠黄芪组显著低于模型对照;15周的大鼠模型对照组和黄芪组显著高于空白对照组(P<0.05),而黄芪组和黄芪-山楂对药组显著低于模型对照组(P<0.05)。<br> 5.血清炎症因子的浓度:随着实验时间的增加完全不会影响IL-6的浓度(P>0.05),反而不同组别间的IL-6浓度存在显著差异(P=0.000)。8周的大鼠空白对照组明显低于模型对照组、山楂组,模型对照组明显高于黄芪组、对药组。15周的大鼠空白对照组明显低于模型对照组、黄芪组和山楂组,模型对照组显著高于黄芪组、山楂组和对药组。<br> 随着实验时间的增加完全不会影响TNF-α的浓度(P>0.05),反而不同组别间的TNF-α浓度存在显著差异(P=0.000),8周各组大鼠TNF-α浓度不存在显著差异(P>0.05),15周各组大鼠的TNF-α的浓度存在显著差异(P=0.000),15周的大鼠空白对照组明显低于模型对照组、黄芪组和对药组,模型对照组显著高于黄芪组和对药组。<br> 6.脏器指数:卵巢指数结果显示15周的大鼠空白对照组明显高于模型对照组、黄芪组和对药组(P<0.05),黄芪组显著低于模型对照组(P<0.05);子宫指数结果显示15周各组大鼠不存在显著差异(P>0.05);生殖器周围脂肪指数结果显示15周的大鼠空白对照组明显低于其余各组(P<0.05),差异有统计学意义。<br> 7.卵巢组织形态学分析:空白对照组各级卵泡数量丰富,发育正常,颗粒层细胞排列整齐、致密,少量卵泡扩张;模型对照组较多卵泡呈囊性扩张,结缔组织排列疏松。颗粒细胞层减少2~3层,膜细胞层增厚;黄芪组各级卵泡数量丰富,少量卵泡扩张;山楂组各级卵泡数量丰富,少量卵泡扩张,少量黄体颗粒细胞肿胀,胞质疏松淡染;对药组各级卵泡数量丰富,少量卵泡扩张。<br> 结论<br> 1.高脂饮食诱导PCOS造模情况:经过15周的高脂饮食诱导,模型对照组出现高雄激素,动情周期紊乱,卵巢呈多囊样改变,在肥胖、IR和炎症因子等水平上均高于空白对照组,较好的复制了PCOS大鼠模型。<br> 2.黄芪、山楂和黄芪-山楂对药对于大鼠PCOS的影响:黄芪-山楂对药对于改善PCOS大鼠动情周期紊乱、卵巢PCO、和高雄激素水平、糖脂代谢、高炎症水平等方面效果显著;黄芪对于PCOS大鼠的作用效果与黄芪-山楂对药较为接近;山楂在改善PCOS大鼠动情周期紊乱、卵巢PCO和改善糖脂代谢效果较差,但是山楂长时间的使用是可以降低高雄激素水平和高炎症水平。
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