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针刀干预对兔膝骨关节炎韧带BMP-12/Smad信号通路相关因子的影响

摘要目的<br>  本实验通过观察针刀在KOA治疗中对兔行为学、组织形态学及韧带组织中BMP-12、Smad1/5/8、COL-Ⅰ的基因和蛋白表达的调控作用,以探讨针刀在KOA治疗中促进韧带愈合与改善韧带特性的内在机理,为针刀干预治疗KOA提供更多的实验依据。<br>  方法<br>  将6月龄、清洁级、日本大耳白兔32只随机分为空白组、模型组、电针组和针刀组,采用改良后Videman法固定制动构建KOA兔模型。电针组和针刀组分别进行为期3周的治疗干预,电针组选取阳陵泉、阴陵泉、内膝眼和外膝眼4个穴位进行电针治疗,针刀组施行对内、外侧副韧带和髌韧带由中段向韧带起止点处来回进行松解操作。在造模后、治疗后分别进行行为学观察评估;膝关节腔大体结构和光镜下组织观察兔患肢膝关节韧带的病理表现;应用WesternBlot法与Real-timePCR法分别检测韧带组织中BMP-12、Smad1/5/8、COL-Ⅰ的蛋白翻译和基因转录的水平。分别对以上指标进行统计分析,以观察针刀对膝骨关节炎兔的调节作用。<br>  结果<br>  1.行为学结果:造模后,模型组、电针组、针刀组兔LequesneMG积分与空白组比升高明显(P<0.05)。治疗后,电针组与针刀组的积分均下降明显,与模型组比份数有显著性差异(P<0.05),且针刀组比电针组评分较低(P<0.05)。积分改善方面,空白组实验兔评分正常,与其他三组比较分数变化均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针组、针刀组积分改善程度较大(P<0.05)。电针组与针刀组之间可见显著性差异(P<0.05)。<br>  2.组织形态学结果:关节腔大体观察和韧带组织光镜下观察均可看到模型组KOA病理状态明显,关节肿胀充血,韧带条索无光泽、变薄、且与周围组织有粘连现象,滑膜出现增生,关节液变混浊、量明显增多,关节软骨有缺损粗糙、色泽变暗,有骨赘形成,镜下可见胶原纤维疏松甚或断裂,排列紊乱,正常胶原纤维束消失,成纤维细胞核排列杂乱,数量明显增多,形态发生改变。电针组和针刀组的上述表现均有不同程度的减轻,且针刀组改变较为明显。<br>  3.WesternBlot法检测结果:与空白组对照,模型组兔膝关节韧带中BMP-12、Smad1/5/8、CoL-Ⅰ的蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组对比,电针组与针刀组BMP-12、Smad1/5/8、CoL-Ⅰ的含量表达均见上调(P<0.05)。与电针组相较,针刀组韧带在CoL-Ⅰ表达水平方面可见升高趋势(P<0.05),但在BMP-12、Smad1/5/8的表达差异无统计学意义(P>0.05)。<br>  4.Real-timePCR法检测结果:与空白组相比,模型组兔患肢膝关节韧带BMP-12、CoL-Ⅰ的mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,电针组与针刀组BMP-12、CoL-ⅠmRNA含量表达总体呈上调(P<0.05)。与电针组相较,针刀组韧带中CoL-Ⅰ基因表达水平方面呈现增高趋势(P<0.05),BMP-12基因转录水平差异却无显著统计学意义(P>0.05)。空白组、模型组、电针组、针刀组韧带中Smad1/5/8mRNA含量表达层面两两相比差异均无统计学意义(P>0.05)。<br>  结论<br>  1.电针与针刀两种干预治疗方法对KOA兔模型在一般情况、行为学、组织形态学、韧带中相关因子的表达方面均有改善作用,而针刀的效果更佳。<br>  2.针刀的干预作用可以激活BMP-12/Smad信号通路,来激发韧带组织中腱细胞的生成与分化,促进韧带的内源性愈合,纠正膝关节的力学环境。<br>  3.针刀的干预作用可以促进COL-Ⅰ的生成,以强化胶原纤维及纤维束的力学特性,优化软骨细胞的生存环境。

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导师 燕平
学位信息:
山西中医药大学 中医学 针灸推拿学(硕士) 2021年
分类号 R684.3R245.31
发布时间 2021-12-01
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