换一批
换一批摘要mRNA3''末端加工包括mRNA前体pre-mRNA3''末端的切割和多聚腺苷酸化两个过程，CPSF复合物（cleavageandpolyadenylationspecificityfactor）主要负责mRNA前体切割和多聚腺苷酸化位点PAS（poly（A）site）的识别。CPSF对PAS位点的正确识别是3''末端加工中至关重要的一步。迄今为止，虽然CPSF的核心复合物与PASRNA结合的结构已经得到解析，但是对于CPSF复合物如何调控识别PAS信号的分子机制还不十分清楚。其中，对于CPSF亚基Fip1和CPSF30的C末端的锌指结构域如何调控PASRNA的识别还有待发现。尤其是Fip1蛋白，只有酵母中的Fip1蛋白N端一段约25个氨基酸的小肽与polyA聚合酶Pap1复合体的结构得到解析，而对于中心区域~7KDa的在真核生物中高度保守的序列，还有C端的与CFIm（cleavagefactorIm）和RNA结合部分的构象都还未知。<br> 本论文研究分别在体外表达纯化了Fip1蛋白和CPSF30的C末端连续锌指结构域ZF4-ZF5蛋白，并得到了二者稳定的复合物。并运用液体核磁共振（solutionNMR）方法在研究柔性大分子方面的优势，初步鉴定了在复合物中Fip1中心保守结构域的二级结构特征。通过NMR滴定实验探讨了复合物与PASRNA的结合，得到了复合物与RNA结合的关键区域信息。<br> 基于以上实验结果，我们推测Fip1与CPSF30复合物可能通过抑制CPSF对PASRNA的结合来调控CPSF蛋白机器对多聚腺苷酸化位点的识别过程，为对真核mRNA多腺苷酸化过程中CPSF复合物的分子机制研究奠定了基础。
更多相关知识
- 浏览0
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
