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摘要赖氨酸特异性去甲基酶1（lysine-specificdemethylase1，LSD1）介导的组蛋白甲基化在染色质结构的动态转变中起重要作用，并对基因转录进行严格调控，导致肿瘤的进展。核糖原合成酶激酶3beta(glycogensynthasekinase3beta，GSK3β)能通过对LSD1的磷酸化和脱泛素化促进肿瘤发生。有研究表明，将LSD1抑制剂和GSK3β抑制剂联合使用时的抗肿瘤活性比单独使用时大大提高。为了开发机制新、活性好的抗肿瘤药物，根据GSK3β和LSD1在肿瘤发生发展中展现的紧密联系，本论文创新性的提出了GSK3β/LSD1双靶点抑制剂，此抑制剂同时抑制GSK3β和LSD1两个靶点，预计具有高效低毒的抗肿瘤活性，给患者提供全新的治疗思路。<br>　　LSD1抑制剂GSK354和GSK3β抑制剂CHIR99021的结构在空间上高度相似，可看作T型，而课题组前期积累的骨架3,4,5-二取代-4H-1,2,4-三氮唑也显现出T型的空间结构，因此将其选做GSK3β/LSD1双靶点抑制剂的骨架进行进一步结构优化。<br>　　确定骨架之后，本论文首先根据原料可得性和合成便宜性得到了一批带有羧基的化合物系列I，然后对此系列进行了细胞增殖抑制实验，实验结果证实此类化合物具有初步的抗肿瘤活性，因此本论文选择以3,4,5-二取代-4H-1,2,4-三氮唑作为本课题的化合物骨架。为了增加此类化合物的溶解性，本论文在系列I的结构基础上，去掉羧基，将其换为能增强蛋白结合和提高脂溶性的卤素原子，经过合成得到了化合物系列II，其酶活性是化合物系列I的4.7倍。接下来，为丰富支链结构类型，本论文选择结构类型差异较大的支链R1、R2和R3进行计算机辅助设计筛选，经过合成得到了结构类型丰富的化合物系列III，系列III在体外活性筛选中展现出抗肿瘤活性。<br>　　其中，化合物g4、g8、g16和g22抑制H1975细胞系增殖的IC50分别为0.043μM、0.058μM、0.880μM和0.107μM，后续将进一步寻找相关靶点；化合物g9抑制HGC27细胞系增殖的IC50为0.653μM；化合物g8、g9、g15、g17、g20、g26、g27、g28、g29、g32、g33、g34、g35和g37抑制LSD1活性的IC50为1.807μM-9.197μM；化合物g9对细胞系HGC27和蛋白LSD1均有较好的抑制活性，可作为LSD1抑制剂进行开发。遗憾的是，本论文尚未发现有化合物对GSK3β有较好的抑制活性，课题组将在以后的研究中在尽量保留化合物对LSD1抑制活性的基础上，提高对GSK3β的抑制活性。<br>　　综上，为了开发具有自主知识产权的GSK3β/LSD1双靶点药物，本论文结合计算机辅助设计和传统药化设计思路，以3,4,5-二取代-4H-1,2,4-三氮唑为骨架，设计了三组不同类型的3,4,5-二取代-4H-1,2,4-三氮唑类化合物并进行合成和体外活性筛选，丰富的支链为深入研究GSK3β/LSD1双靶点抑制剂的构效关系和相关机制提供详实的数据和为进一步开发GSK3β/LSD1双靶点药物打下坚实的基础。