摘要目的:<br> 通过对比慢性鼻-鼻窦炎伴或不伴鼻息肉患者与正常对照组中人前梯度蛋白2(AGR2)与黏蛋白5AC(MUC5AC)的病理染色情况及相关蛋白和mRNA表达水平的差异,初步讨论AGR2在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)发生机制中的作用;另一方面,通过对AGR2和MUC5AC表达水平的相关性分析,探讨CRS中黏蛋白产生的分子机制,为AGR2可能参与CRS黏液高分泌的调控提供佐证,为黏液高分泌相关疾病的靶向治疗提供新的参考。<br> 方法:<br> 收集15例伴有鼻息肉的CRS患者的息肉组织,15例不伴鼻息肉的CRS患者下鼻甲黏膜和15例鼻中隔偏曲或鼻外伤病人的下鼻甲黏膜组织,通过苏木精-伊红染色(HE染色)观察各组鼻黏膜组织形态学改变,采用爱先蓝-糖原染色(AB-PAS染色)观察鼻黏膜上皮杯状细胞改变和黏蛋白(MUC)的表达情况,用免疫组织化学染色(IHC)与定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测AGR2和MUC5AC在鼻黏膜组织中的表达。<br> 结果:<br> 1、HE染色结果显示,CRSsNP组和CRSwNP组患者与对照组相比,鼻黏膜上皮增厚,可见杯状细胞增生明显以及鼻黏膜组织中炎症细胞浸润。<br> 2、AB-PAS染色显示,在所有分析病例中,可见酸性黏蛋白MUC广泛表达于上皮的杯状细胞中,染色呈现较强的蓝色。对照组MCU的光密度值为3.98%±1.74%;CRSsNP组MUC的光密度值为14.69%±2.85%;CRSwNP组MUC的光密度值为17.01%±3.62%,与对照组相比,CRSsNP和CRSwNP组上皮MUC均高表达(呈显著蓝色)(均Plt;0.05),而两组之间阳性表达率无统计学差异(Pgt;0.05)。<br> 3、黏蛋白5AC染色显示,MUC5AC在CRSsNP组和CRSwNP组黏膜上皮呈大面积的棕黄色染色,主要位于杯状细胞的胞浆内,而对照组可见上皮有零散分布的浅黄色着色。对照组MUC5AC的光密度值为2.78%±1.36%;CRSsNP组MUC5AC的光密度值为16.18%±5.88%;CRSwNP组MUC5AC的光密度值为19.60%±4.26%,CRS两组分别与对照组相比结果均有统计学差异(均Plt;0.05);但两组间差异无统计学意义(Pgt;0.05)。<br> 4、AGR2染色显示,AGR2在CRSsNP或CRSwNP黏膜上皮胞质中呈大量棕褐色着色,对照组上皮可见零散分布的棕黄色着色。CRSsNP组AGR2的光密度值为20.26%±2.97%;CRSwNP组AGR2的光密度值为23.87%±6.38%,对照组AGR2的光密度值为3.76%±1.95%;CRS两组分别与对照组相比均有统计学差异(均Plt;0.05),但两组之间结果无统计学差异(Pgt;0.05)。<br> 5、qRT-PCR检测结果表明,所有病例均检测到AGR2和MUC5AC的mRNA表达。CRSsNP组和CRSwNP组AGR2和MUC5A的mRNA表达水平较正常对照组均显著升高,且差异均有统计学意义(均Plt;0.05)。CRSsNP和CRSwNP两组之间AGR2和MUC5AC的mRNA水平均无明显差异(均Pgt;0.05)。<br> 6、将慢性鼻-鼻窦炎伴或不伴鼻息肉的两组中AGR2和MUC5AC的mRNA表达量,用Spearman相关性检验进行分析,结果显示无论在CRSsNP组还是CRSwNP组中,AGR2mRNA表达量与MUC5ACmRNA表达量均存在一种近似线性的关系(即正相关性)(r=0.68,r=0.76,均Plt;0.05);这种关系结果提示AGR2基因表达上调可能对MUC5AC的产生起促进作用。<br> 结论:<br> AGR2和MUC5AC在CRS患者鼻黏膜中高表达,且两者存在线性相关,提示AGR2可能被认为是调节CRS患者黏液高分泌的治疗靶点。
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