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摘要目的：<br>　　为了对中药质量标志物（Q-marker）进行筛选，本论文在课题组前期初步研究基础上，拟建立基于磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C（PC-PLC）的中空纤维靶标捕获方法，并结合高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UVD）用于姜黄药材中Q-marker的初步筛选与鉴定；拟采用新型萃取剂，对常规的分散液相微萃取进行改进，以建立更加简便、高效、环境友好的样品前处理方法，用于初步筛选出的中药Q-marker的富集和纯化，以提高测定灵敏度。<br>　　方法：<br>　　以中空纤维作为载体，使其壁孔填充庚醇、内腔充满PC-PLC溶液，并将此纤维置于姜黄提取液制得的样品相溶液中，恒温搅拌筛选。对影响筛选的因素进行优化，并在最佳筛选条件下进行方法学考察，结合HPLC-UVD对姜黄药材中的Q-marker进行初步筛选与鉴定。另外，通过对筛出化合物的PC-PLC抑制活性考察。<br>　　在初步确定姜黄Q-marker并明确其抑制作用的基础上，我们将四丁基氯化铵和癸酸所制备的低共熔溶剂作为萃取剂加入到含有活性化合物的样品相溶液中。恒温搅拌萃取后，通过冷冻操作收集萃取剂进样分析；对萃取条件进行了优化，在最佳条件下对该方法的效能指标进行了考察，结合HPLC-UVD对姜黄药材中的Q-marker以及姜黄茶中的有效成分进行定量分析。并将所建方法与ChP2015以及其他已报道方法的结果进行比较，以进一步证明所建方法的可行性。<br>　　以疏水性天然低共熔溶剂（L-薄荷醇—乳酸）代替传统的有机溶剂作为萃取剂，将其加入到含有分析物的样品相溶液中。通过手动振摇促进分散，加入破乳剂终止萃取，并收集上层萃取剂进样分析。采用单因素优化与中心组合设计优化法相结合，对影响萃取效率的主要因素进行考察，探究变量间的相互作用关系，在最佳萃取条件下，对该方法的效能指标进行考察，并结合HPLC-UVD对姜黄药材中的Q-marker以及姜黄茶中的有效成分进行富集和测定。<br>　　结果：<br>　　中空纤维靶标捕获的最佳试验条件：壁孔溶剂为庚醇，样品相体积6mL（pH6.8），靶标浓度1mg/mL（pH6.0），筛选温度45℃，筛选时间90min，样品相中双去甲氧基姜黄素最佳筛选浓度为6?g/mL、去甲氧基姜黄素4?g/mL、姜黄素5.3?g/mL。靶标中空纤维筛选出来的活性化合物色谱峰面积明显大于磷酸盐缓冲液及空白对照的筛选结果；在此筛选与测定条件下（420nm），捕获的活性化合物分别为双去甲氧基姜黄素（tR14.164）、去甲氧基姜黄素（tR16.242）和姜黄素（tR18.652），不同产地药材中的某一活性成分结合能力相似。姜黄素为PC-PLC的抑制剂。<br>　　低共熔溶剂漂浮凝固液相微萃取方法的最佳试验条件：萃取剂为摩尔比1:1的TBAC-癸酸70??L；样品相pH3.0；萃取时间10min；萃取温度40℃；搅拌速度1100rpm。在此条件下，该方法对三种Q-marker的富集倍数在608-848之间；线性范围分别为：双去甲氧基姜黄素0.001-0.7?g/mL、去甲氧基姜黄素0.0015-0.75?g/mL、姜黄素0.002-0.8?g/mL；测定系数大于0.9900；检测限和定量限分别为7.0×10-5-9.0×10-5?g/mL和2.0×10-4-3.0×10-4?g/mL；日内和日间精密度相对标准偏差分别为2.4%-4.2%和1.4%-3.7%；平均回收率84.6%-116.8%。该法结合HPLC-UVD测得姜黄药材中的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素的平均含量分别为2.95、2.42和5.12mg/g；姜黄茶中上述三种化合物的平均含量为1.40、1.54和4.15mg/g。<br>　　天然低共熔溶剂溶剂终止分散液相微萃取的最佳试验条件：以摩尔比1:2的L-薄荷醇—乳酸制得的天然低共熔溶剂160μL作为萃取剂，样品相pH为7.0，盐浓度18%，手动振摇30s；破乳剂为800?L甲醇，破乳时间230s，样品相体积8.0mL。在此条件下，该方法对三种Q-marker的富集倍数在279-350之间；线性范围分别为：双去甲氧基姜黄素0.002-0.8?g/mL、去甲氧基姜黄素0.001-0.7?g/mL、姜黄素0.0015-0.75?g/mL；测定系数大于0.9900；检测限和定量限分别为1.0×10-4-4.0×10-4?g/mL和4.0×10-4-1.2×10-3?g/mL；日内和日间精密度相对标准偏差分别为3.0%-9.2%和2.2%-6.2%；平均回收率85.3%-108.9%。该法结合HPLC-UVD测得姜黄药材中的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素的平均含量分别为5.18、2.4和6.19mg/g；姜黄茶中上述三种化合物的平均含量为2.24、1.43和4.7mg/g。<br>　　结论：<br>　　本文建立了基于PC-PLC的中空纤维靶标捕获法，为中药Q-marker辨识提供了一种便捷的方法；将低共熔溶剂成功应用于不同模式的分散液相微萃取操作中，扩展了低共熔溶剂在液相微萃取技术中的应用，为复杂样品分析提供了更为简便、绿色、高效的前处理方法。