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摘要背景和目的<br>　　急性胰腺炎（acutepancreatitis，AP）是胰酶过早活化导致胰腺自身消化的炎症性疾病。目前，临床上对AP仍无特别有效的治疗药物。已有研究表明，AP最初的发病机制是胰腺腺泡细胞内钙超载。近年来，有证据表明，黄连素和选择性大麻素受体2（cannabinoidtype2receptor，CB2R）激动剂GW405833对胰腺腺泡细胞内的钙信号有抑制作用。另有研究表明，黄连素和选择性CB2R激动剂对实验性AP有保护作用。然而，相关研究大多集中在造模后1小时内或预防性给予黄连素或大麻素受体激动剂，而急性胰腺炎后期给药却鲜少有研究。另外，黄连素和选择性CB2R激动剂联合用药是否有协同作用，这也是未知的。所以，本研究旨在探讨黄连素和选择性CB2R激动剂GW联合用药对胰腺腺泡细胞内钙信号的影响和在实验性AP后期，不同药物剂量、不同给药方式和联合给药对AP的影响。<br>　　方法<br>　　1、小鼠胰腺腺泡细胞的分离：选用5月龄及以上的CD1和C57雄鼠，麻醉，颈椎脱臼处死，迅速分离胰腺组织，用胶原酶液消化分离得到腺泡细胞悬液。<br>　　2、单细胞膜片钳记录：在全细胞模式下记录乙酰胆碱（ACh）诱导的钙振荡，并检测不同浓度黄连素、GW和联合用药对其的影响。<br>　　3、动物实验分组：（1）AP组（左旋精氨酸（L-Arg），4g/kgi.p.）；（2）黄连素（50mg/kg）联合癸酸钠（50mg/kg）灌胃治疗组；（3）黄连素腹腔注射治疗组（10，5mg/kg）；（4）GW治疗组（5mg/kgi.p.）；（5）联合用药治疗组（5mg/kg（BBR+GW）i.p.）；（6）对照组。<br>　　4、小鼠急性胰腺炎模型的制备和检测：选取3月龄及以上的CD1雄鼠，腹腔注射L-Arg，2次，间隔1小时，制备急性胰腺炎动物模型。造模后8小时、32小时、56小时给予药物治疗，在注射第二针L-Arg后72小时，处死小鼠，采集血样和胰腺组织，分别用于检测血清淀粉酶（AMS）活性和制作胰腺组织病理切片。<br>　　5、数据的分析和处理：对给药前后的自身对比用配对T检验，多组实验数据的对比用单因素方差分析或Kruskal-Wallis秩和检验。<br>　　结果<br>　　1、单细胞膜片钳结果：黄连素和GW都对乙酰胆碱诱导的钙震荡有抑制作用；与前对照相比，100nM黄连素和100nMGW联合给药将钙震荡的标准化净电流减少至30%±7.9%（P＜0.001，N=7），用Webb分数乘积法的公式计算出q=2.1，表明在该剂量下两药联合使用具有协同作用。<br>　　2、动物实验结果：在左旋精氨酸造模后8小时，黄连素（50mg/kg）联合癸酸钠（50mg/kg）灌胃治疗，不能明显减轻血清淀粉酶活性的升高，但减轻了AP引起的胰腺病理损伤；腹腔注射黄连素（10，5mg/kg）或GW（5mg/kg）不能明显减轻AP引起的血清淀粉酶活性的升高和胰腺病理损伤；联合腹腔注射黄连素（5mg/kg）和GW（5mg/kg）不能明显减轻AP引起的血清淀粉酶活性的升高和胰腺病理损伤。<br>　　结论<br>　　我们首次证明了100nM黄连素和100nMGW联合给药对乙酰胆碱诱导的钙震荡的抑制有协同作用。在实验性AP的后期，黄连素联合癸酸钠灌胃治疗，对AP有保护作用，而黄连素和GW，无论单独还是联合腹腔注射，都对AP没有明显的保护作用，这提示AP的治疗可能存在时间依赖性。