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摘要背景与目的：<br>　　卵巢癌是我国目前死亡率最高的妇科恶性肿瘤，其发病率逐年上升，严重威胁妇女的生命健康。患者行肿瘤细胞减灭术及辅以铂类为基础的标准化疗后大多获得缓解，但超过50%的晚期卵巢癌患者在治疗后的最初5年内复发并对标准化疗产生耐药，耐药性的产生是导致卵巢癌病人预后差和死亡率高的主要原因。近年来，越来越多的研究表明组蛋白去乙酰化酶家族(HistoneDeacety-lases,HDACs)与内质网应激(EndoplasmicReticulumStress,ERS)在肿瘤的发生发展中存在着密切联系：在黑色素瘤，肺癌，神经胶质瘤等肿瘤细胞中，过表达组蛋白去乙酰化酶6(HistoneDeacetylase6,HDAC6)可激活内质网应激通路促进肿瘤细胞增殖、抑制凋亡和增强肿瘤细胞化疗耐药性。然而，HDAC6在卵巢癌顺铂耐药中作用尚不明确。本研究旨在明确HDAC6抑制剂TubastatinAHCL(TUB)能否逆转卵巢癌顺铂(Cisplatin)耐药性及其作用分子机制。<br>　　方法：<br>　　1.CCK8法检测卵巢癌顺铂敏感株A2780和顺铂耐药株A2780-DDP顺铂半抑制浓度(HalfMaximalInhibitoryConcentration,IC50)，计算A2780-DDP的顺铂耐药指数(ResistanceIndex,RI)。<br>　　2.蛋白质表达定量分析检测A2780和A2780-DDP中HDAC6，VCP蛋白表达情况。<br>　　3.以A2780-DDP为研究对象，通过CCK8法和流式细胞术检测不同浓度TUB单独或联合1.5μM顺铂时对细胞增殖、凋亡水平影响。<br>　　4.以A2780-DDP为研究对象，进行实验分组：完全培养基组(以下简称“空白对照组”)，1.5μM顺铂(以下简称“单药组”)，1.5μM顺铂+9μMTUB组(以下简称“联合用药组”)。<br>　　5.TUNEL荧光染色法检测各分组细胞凋亡情况。<br>　　6.运用qPCR技术和蛋白质表达定量分析技术检测各分组细胞ERS信号通路分子及肿瘤耐药相关分子：转录因子-肿瘤核因子E2相关因子2(NuclearFactorErythroid2-RelatedFactor2,Nrf2)和多药耐药相关蛋白1(MultidrugResistanceAssociatedProtein1,MRP1)的mRNA及蛋白表达情况。<br>　　结果：<br>　　1.A2780-DDP细胞的RI=2.9；蛋白质表达定量分析结果显示：与A2780细胞相比，HDAC6在A2780-DDP细胞中过表达(1.59±0.21倍)，而VCP在A2780-DDP细胞中更低表达(0.67±0.05倍)，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　2.CCK8结果显示：A2780-DDP细胞经不同浓度(0、1、2.5、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20)μMTUB处理48h后，TUB浓度＜15μM时无明显细胞增殖抑制作用，差异不具有统计学意义(P＞0.05)；流式细胞术结果显示：A2780-DDP细胞经不同浓度(0、2.5、5、10、15)μMTUB处理48h后，TUB浓度＜10μM时无明显细胞凋亡诱导作用，差异不具有统计学意义(P＞0.05)。<br>　　3.CCK8结果显示：A2780-DDP细胞经1.5μM顺铂联合不同浓度(0、2.5、5、7.5、10、12.5、15)μMTUB处理48h后，细胞增殖活性抑制明显，呈TUB浓度依赖性，差异均具有统计学意义(P＜0.05)；流式细胞术结果显示：A2780-DDP细胞经1.5μM顺铂联合不同浓度(0、2.5、5、10、15)μMTUB处理48h后，细胞凋亡诱导明显，呈TUB浓度依赖性，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　4.TUNEL荧光染色结果显示：相比于空白组和单药组，联合用药组的细胞凋亡明显增强，差异具有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　5.qPCR结果显示：与单药组相比，联合用药组的HDAC6，GRP78，ATF4，MRP1，Nrf2的mRNA表达量呈不同程度的减少，而PERK，eIF2α，CHOP，VCP的mRNA表达量呈不同程度的增加，除eIF2α外，其他指标差异均具有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　6.蛋白质表达定量分析结果显示：与单药组相比，联合用药组的HDAC6，MRP1，Nrf2的蛋白表达量呈不同程度的减少，而GRP78，PERK，eIF2α，VCP呈不同程度的增加，除eIF2α外，其他指标差异均具有统计学意义(P＜0.05)。<br>　　结论：<br>　　TUB能够增强顺铂对A2780-DDP细胞增殖及凋亡毒性，两者联合作用可能存在协同作用。TUB一方面通过过度激活ERS通路，触发致死性信号；另一方面降低耐药相关基因MRP1，Nrf2表达，逆转卵巢癌细胞顺铂耐药性。