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摘要背景与目的：<br>　　子宫内膜癌(EndometrialCarcinoma,EC)是来源于子宫内膜上皮的一组恶性肿瘤。EC的发病率和死亡率正在逐年上升，严重威胁妇女的健康。目前治疗的方案主要是以手术为主，其次是以放疗、化疗、激素治疗等辅助手段进行综合治疗。最近几年，早期诊断，手术，放疗和化疗可以显著改善治疗效果，但对治疗早期病灶并需要保留生育能力，晚期和复发的患者仍然有限。因此，探寻子宫内膜癌发生、发展及耐药的潜在分子机制，寻找新颖的生物标志物和有效的治疗靶点迫在眉睫。<br>　　当今临床面临的最大挑战之一是开发可临床应用且功能强大的生物标记物，以预测预后并选择更可能受益患者的治疗。为了改善子宫内膜癌的治疗预后，需要发展可独立预测的更强大的生物标志物。子宫内膜癌的演化是一个多基因参与，多步骤发展的过程，主要与原癌基因的激活与抑癌基因的丢失或突变有关。目前多种原癌基因和（或）抑癌基因的发现能部分阐明肿瘤的发生机制。如果这些基因能够合理的解释肿瘤的某些生物学行为，为进一步临床治疗提供依据，那么这些基因有可能成为未来肿瘤治疗的靶点，而深入研究这些基因的作用机制及功能则是重要前提。由于芯片和高通量测序技术的广泛应用，积累了越来越多的有关肿瘤研究领域的基因组学数据，这些数据库为肿瘤学的研究提供了一定的便利。由于子宫内膜癌发病机理复杂，参与EC的发生和发展的关键基因尚不完全清楚。因此，本研究的目是运用生物信息学筛选全基因组差异表达基因和子宫内膜癌信号通路中的关键基因，探讨EC发病机制和预后的潜在生物标志物，为EC的早期筛查和靶向治疗提供理论依据。<br>　　实验方法：<br>　　1.数据处理：我们基于癌症基因组图谱（TCGA）和基因表达综合（GEO）数据库中子宫内膜癌的数据进行生物信息学综合分析，我们对3个独立的数据集的可用转录组数据进行了综合分析，鉴定出差异表达基因(differentiallyexpressedGenes，DEGs)。信号通路筛选和评估成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBproto-oncogenelike2，MYBL2)基因表达水平与临床病理特征和生存的关系。<br>　　2.临床验证：通过免疫组织化学染色方法验证子宫内癌组织中MYBL2基因的表达情况，与临床病理特征的关系。<br>　　3.细胞增殖实验：建立了两个代表性的EC细胞模型，观察sh-MYBL2抑制MYBL2表达时EC细胞的增殖能力。RNA-seq实验技术分析MYBL2沉默对子宫内膜癌细胞模型转录组的影响。<br>　　结果：<br>　　1.TCGA联合GEO数据库（3个数据集）共筛选出5个DEGs，即ASPA、MYBL2、TROAP、CCNB2和CDC25C(P均＜0.05)；5个DEGs中，MYBL2高低表达EC患者总生存期(OverallSurvival，OS)和无病生存期(Disease-freeSurvival，DFS)差异有统计学意义(P＜0.05)，且组织低分化、Ⅱ型EC患者MYBL2基因高表达比例分别高于高分化、Ⅰ型患者(P均＜0.05)。<br>　　2.本研究通过子宫内膜癌信号通路的筛选，发现MYBL2在B-MYB/FOMX1信号通路起重要作用。子宫内膜癌经典信号通路中关键基因EGF、IGF、TGF在子宫内膜癌中低表达，且与子宫内膜癌的生存无关，最终筛选出关键基因MYBL2。<br>　　3.MYBL2在子宫内膜癌中存在明显的拷贝数变异（copy-numbervariation，CNV）（p＜0.001），主要的变异形式为基因扩增，且拷贝数的扩增明显上调了MYBL2mRNA表达水平（p＜0.001），携带MYBL2基因CNV的子宫内膜癌患者OS与DFS均明显低于不携带该基因CNV的患者（P＜0.05）。Ⅱ型子宫内膜癌中MYBL2的CNV变异更显著（P﹤0.05）。<br>　　4.MYBL2的高表达与子宫内膜癌的病理类型、病理分期和不良预后有关（P＜0.05），与患者患病年龄、月经情况和FIGO分期无显著性关联（P＞0.05）。<br>　　5.临床验证结果发现子宫内膜癌组织中MYBL2蛋白的表达量明显高于对应癌旁正常子宫内膜组织，且在癌组织中表达的阳性率高于癌旁组织（P＜0.05）。MYBL2在子宫内膜癌组织中过表达，与不同病理类型、组织分级和有无淋巴结转移有关（P＜0.05）。<br>　　6.MYBL2基因表达的下调可以显著抑制子宫内膜癌细胞系HEC-1-B和AN3CA体外细胞增殖，并使子宫内膜癌细胞阻滞在G1期，诱导子宫内膜癌细胞凋亡。<br>　　7.RNA-seq技术和通路富集分析，发现MYBL2与细胞周期和细胞凋亡这两个通路密切相关，可以激活与细胞增殖有关的基因表达。<br>　　结论：<br>　　1.子宫内膜癌全基因组差异性表达分析，发现MYBL2在子宫内膜癌中高表达，且与不良预后相关，因此MYBL2基因是子宫内膜癌发生发展的关键基因。<br>　　2.本研究首次发现，MYBL2基因在子宫内膜癌组织中存在明显拷贝数的扩增，拷贝数的扩增影响其表达和生存，说明MYBL2的DNA变异促进了子宫内膜癌的发生和发展。<br>　　3.子宫内膜癌组织中MYBL2呈高表达，且与不良临床病理特征相关，提示MYBL2可能在肿瘤发生、发展和转移过程中起着重要的作用。<br>　　4.MYBL2可能通过调控细胞周期，促进细胞增殖，抵抗凋亡，在子宫内膜癌细胞的增殖中起关键作用，说明MYBL2在子宫内膜癌进展中发挥其致癌作用。<br>　　5.MYBL2可能作为一种新的EC患者预后和治疗指标的生物标志物。