检索历史 清除

摘要目的：通过对CUMS模型小鼠行为学观察及海马ERK、p-ERK、CREB、p-CREB蛋白的检测，探讨化浊解毒疏肝方在ERK/CREB信号转导通路中的抗抑郁机制。<br>　　方法：健康雄性ICR小鼠50只，适应性饲养7天后，根据随机数字表法分为正常组(CON)、模型组(CUMS)、化浊解毒疏肝方高剂量组（HJSF-H，14.04g/kg/d）、化浊解毒疏肝方低剂量组（HJSF-L，7.02g/kg/d）、氟西汀组(FLU，10mg/kg/d），每组10只，采用慢性不可预知温和刺激(CUMS)加孤养造模。造模共六周，前三周只造模，后三周造模同时给药治疗。并于第1，4，7周进行糖水偏爱实验和称重。给药结束后，进行水迷宫实验，旷场实验，悬尾实验和新奇抑制摄食实验等行为学检测。运用Westernblot方法检测小鼠海马ERK、p-ERK、CREB、p-CREB蛋白表达，并通过Real-timePCR检测海马ERK、CREBmRNA表达水平和运用免疫荧光染色法检测海马ERK的IOD值表达情况。<br>　　结果：<br>　　1.行为学观察结果<br>　　（1）糖水偏爱实验，造模前，各组小鼠糖水偏爱值无显著差异；造模后，造模组糖水偏爱值减少；治疗后，模型组的糖水偏爱值降低，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组糖水偏爱值增加。<br>　　（2）体重实验，造模前，各组小鼠体重无显著差异；造模后，造模组体重减少；治疗后，模型组的体重降低，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组体重增加。<br>　　（3）水迷宫实验，模型组穿越平台次数减少，目标象限停留时间缩短，逃避潜伏期时间延长，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组穿越平台次数增加，目标象限停留时间延长，逃避潜伏期时间缩短。<br>　　（4）旷场实验，模型组直立、梳洗、走格次数减少，行走总路程减少，中央区停留时间缩短，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组直立、梳洗、走格次数增加，行走总路程增加，中央区停留时间延长。<br>　　（5）悬尾实验，模型组悬尾不动时间延长，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组悬尾不动时间缩短。<br>　　（6）新奇抑制摄食实验，模型组摄食量减少，摄食潜伏期时间延长，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组摄食量增加，摄食潜伏期时间缩短。<br>　　2.Westernblot检测结果<br>　　模型组ERK、p-ERK、CREB、p-CREB蛋白表达下降，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组ERK、p-ERK、CREB、p-CREB蛋白表达增加。<br>　　3.Real-timePCR检测结果<br>　　模型组ERK、CREBmRNA水平下降，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组ERK、CREBmRNA增加。<br>　　4.免疫荧光结果<br>　　模型组CA3区IOD值降低，氟西汀组和化浊解毒疏肝方高、低剂量组CA3区IOD值增加。<br>　　结论：<br>　　1.采用CUMS加孤养的饲养模式复制抑郁症模型，小鼠表现为糖水偏爱值和体重减少、目标象限停留时间缩短，悬尾不动时间和摄食潜伏期延长，提示造模成功。<br>　　2.化浊解毒疏肝方能有效改善模型小鼠抑郁行为，疗效与氟西汀相当，并以化浊解毒疏肝方高剂量组疗效显著。<br>　　3.经化浊解毒疏肝方治疗后，ERK，p-ERK，CRBE，p-CREB，ERKmRNA，CREBmRNA表达增加，提示化浊解毒疏肝方可能是通过调节ERK/CREB信号转导通路来发挥抗抑郁作用。