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摘要肿瘤、缺血及炎症等诸多疾病都会在病变部位产生酸性的细胞外微环境，这种细胞外微酸环境也为这些疾病的诊断和治疗提供了新的契机。酸响应肽（ThepHlowresponsivepeptide，pHLIP）可在酸性微环境下自发折叠成跨膜螺旋插入并跨过细胞膜，为靶向这些酸性组织提供新的机会。程序性死亡受体1（Programmeddeath1，PD-1）是一种在活化的T细胞中诱导的抑制性受体。其配体PD-L1和PD-L2与PD-1的结合维持了外周免疫耐受。目的：本研究将母本pHLIP（WTpHLIP）N端与小鼠细胞程序性死亡配体1（Programmeddeathligand1，PD-L1）胞外段C端通过（G4S）3连接子连接后得到重组融合蛋白—mPD-L1-WTpHLIP，并对其功能进行鉴定，为mPD-L1-WTpHLIP蛋白后续应用于自身免疫病的治疗奠定基础。方法：设计mPD-L1-WTpHLIP及对照蛋白（mPD-L1-mFc等）碱基序列，通过HEK293细胞真核表达系统表达相关蛋白，通过尺寸排除色谱法（sizeexclusionchromatography，SEC）及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对蛋白分子量及纯度进行检测。利用ELISA，FACS检测mPD-L1-WTpHLIP与mPD-L1抗体和重组mPD-1蛋白以及细胞膜上表达的mPD-1分子的结合活性。通过FACS、免疫荧光检测验证mPD-L1-WTpHLIP在酸性溶液中的膜插入性及其与重组mPD-1蛋白的结合活性。细胞实验评价mPD-L1-WTpHLIP的免疫抑制功能并明确其作用机制。结果:（1）成功获得纯度较高mPD-L1-WTpHLIP蛋白及对照蛋白；（2）mPD-L1-WTpHLIP与抗mPD-L1抗体和重组mPD-1蛋白以及膜上mPD-1分子结合活性良好；（3）mPD-L1-WTpHLIP具有良好的酸响应性；（4）固相或酸性溶液中mPD-L1-WTpHLIP能够显著抑制淋巴细胞的增殖和IFN-γ分泌，其作用是由PD-1/PD-L1通路所介导。结论:重组蛋白mPD-L1-WTpHLIP具有良好的酸响应性和免疫抑制功能。