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摘要目的：胃癌（gastriccarcinoma,GC）是全球范围内癌症相关死亡的主要原因之一，早期症状无特异性，诊断率低。化疗是晚期胃癌的主要治疗方法之一，化疗药物因其选择性低毒副作用大及易产生耐药性等原因，导致患者的预后较差。本课题所使用的生物活性肽为山羊肝脏提取制备的一种低分子量生物活性物质，命名为抗癌生物活性肽（anti-cancerbioactivepeptide,ABP）。ABP在肿瘤细胞中具有诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖、干细胞特性、血管生成等抗癌作用。通过验证ABP联合奥沙利铂(oxaliplatin,OXA)抑制人胃癌细胞中核仁纺锤体相关蛋白1（Nucleolarandspindle-associatedprotein1,NUSAP1）的表达；探索NUSAP1表达下降后治疗胃癌的机制。为胃癌靶基因筛选、探索安全有效的联合治疗方法做贡献。方法：通过生物信息学数据库GEPIA网站（http://gepia.cancer-pku.cn/）分析确定NUSAP1在人类不同癌症、胃癌组织及正常胃组织中的表达情况。体外细胞培养技术培养人胃癌细胞MKN45、AGS细胞株，培养至细胞85%融合后进行ABP及OXA药物干预，药物使用剂量依据团队前期IC50的检测结果；通过qRT-PCR方法分别检测经ABP、OXA、以及A-O联合处理24h后的MKN45细胞、AGS细胞中NUSAP1转录水平的变化。通过WesternBlotting方法分别检测经ABP、OXA、以及A-O联合处理24h后的MKN45细胞、AGS细胞中NUSAP1蛋白质表达的变化,并且验证NUSAP1表达下降后是否可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活抑制胃癌发展；探索ABP、OXA、以及A-O处理后的MKN45、AGS细胞能否通过抑制上皮间充质转化（epithelialmesenchymaltransformation，EMT）过程，抑制胃癌细胞的转移。通过建立胃癌荷瘤裸鼠的动物模型，探讨施加ABP、OXA、以及联合A-O对于裸鼠体重及荷瘤体积的影响，判断施加药物对于荷瘤裸鼠的治疗效果。通过苏木精—伊红染色法（hematoxylin-eosinstaining,HE）检测施加不同药物处理后裸鼠瘤组织病理结构的变化情况。采用免疫组化（immunohistochemicalmethod，IHC）检测不同组裸鼠瘤组织中NUSAP1的表达差异。结果：（1）GEPIA网站数据分析证明NUSAP1在人类多种癌症中存在高表达；在胃癌组织较正常胃组织中表达显著增高(P＜0.01)。（2）qRT-PCR、WesternBlotting法证明ABP单独施加及A-O施加后人胃癌MKN45细胞、AGS细胞中NUSAP1mRNA转录及蛋白表达下降（P＜0.05）。（3）NUSAP1表达降低可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin、TCF1的表达进而抑制其下游靶因子MET、CycD1、C-myc的表达抑制胃癌细胞的恶性转化。（4）ABP、OXA单独及A-O施加后可能通过抑制EMT过程抑制胃癌细胞的转移。结论：（1）NUSAP1在人胃癌组织、裸鼠荷瘤组织及人胃癌细胞中存在高表达。（2）ABP、OXA单独以及A-O联合施加均可抑制胃癌细胞及裸鼠胃癌荷瘤瘤组织中NUSAP1的表达；联合施加（使用剂量减半）与单独施加OXA对胃癌的抑制效果相当，可以减轻OXA的毒性作用。（3）初步证明ABP、A-O可能通过抑制NUSAP1的表达抑制Wnt/β-catenin通路的激活,并且通过抑制EMT过程抑制胃癌细胞的转移。