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摘要目的：探究乳酸对CD4+T细胞的影响及机制。方法：人外周静脉抗凝血通过密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells,PBMCs），将PBMC分选出的CD4+T细胞供后续实验使用。依据乳酸在溶液中的不同组成成分，分组为未刺激组、刺激后的对照组、乳酸组、乳酸钠组和盐酸组。通过流式细胞术检测非TCR（PMA/离子霉素）刺激后的CD4+T细胞内细胞因子（IL-2和IFN-γ）的产生。ELISA检测TCR（抗人CD3/CD28抗体）刺激后，细胞培养上清的IFN-γ。qPCR检测mRNA水平的IL-2和IFN-γ表达。流式细胞术检测表面抗原CD25和CD69的表达。RT-PCR和WesternBlot检测单羧酸转运蛋白1（Monocarboxylatetransporter1,MCT1）在mRNA水平和蛋白水平的表达。首先使用MCT1的小分子抑制剂，研究MCT1对CD4+T细胞效应功能的影响。进一步通过慢病毒介导shRNA干扰CD4+T细胞MCT1的表达，将带有荧光蛋白标签的慢病毒感染CD4+T细胞通过流式细胞分选仪，分选出阳性CD4+T细胞，使用WesternBlot检测MCT1的敲低效果。将敲低效果较好的慢病毒shRNA用于下一步实验，进一步研究MCT1对CD4+T细胞效应功能的影响。结果：（1）乳酸抑制CD4+T细胞IL-2,IL-4和IFN-γ的产生，同时抑制CD4+T细胞表面活化标志CD25和CD69的表达；（2）乳酸介导的IL-2和IFN-γ产生的抑制作用不依赖于MCT1；（3）MCT1是乳酸抑制CD25和CD69表达所必需的。结论：乳酸抑制CD4+T细胞IL-2和IFN-γ的产生与MCT1无关。