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摘要靶向细胞程序性死亡受体1（programmeddeath1，PD-1）/细胞程序性死亡配体1（programmeddeathligand1，PD-L1）信号通路为代表的抑制剂临床应答率较低（约20%-30%），亟需开发出更多有效的抗肿瘤药物或新的治疗策略。转化生长因子-β（transforminggrowthfactor-β，TGF-β）作为一类调节细胞生长和分化的细胞因子，其在多种恶性肿瘤的发生、浸润和转移过程中发挥重要作用。已经被陆续发现有5种亚型，研究发现同时阻断TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3与受体TGFβRⅡ结合抑制信号传导会导致机体产生严重的心脏毒副作用。而引起心脏毒性作用的主要原因是同时阻断TGF-β2/TGFβRⅡ导致下游信号不能正常传导。目的（1）建立靶向TGF-β抑制剂体外活性评价方法。（2）设计和筛选出和TGF-β1、TGF-β3亲和力基本保持不变和TGF-β2低亲和力的TGFβRⅡ突变体融合蛋白，并对其体外生物学功能初步评价。方法（1）制备包含天然TGFβRⅡ胞外段的Fc融合蛋白（简称“TGFβRⅡ-Fc”），分别利用ELISA法、生物膜干涉技术（Bio-LayerInterferometry,BLI）对TGFβRⅡ-Fc融合蛋白结合活性进行验证；建立荧光素酶报告基因检测平台，并验证TGFβRⅡ-Fc融合蛋白中和效应。（2）借助计算机辅助药物设计平台对TGFβRⅡ参与识别TGF-β1、TGF-2、TGF-3关键位点分析和突变，获得理论上目的TGFβRⅡ虚拟库，对TGFβRⅡ虚拟库进行体外定向优化，获得目的TGFβRⅡ-Fc融合蛋白候选分子，并对候选分子体外生物学功能进行评价。结果（1）建立了TGF-β抑制剂体外活性评价方法。（2）初步筛选获得优选分子TGFβRⅡ-Fc4H4，与天然TGFβRⅡ-Fc分子相比，其具有更优的生物学活性，具有一定的临床应用前景。结论（1）成功建立了TGF-β抑制剂体外活性评价方法。（2）初步筛选出一株优选分子TGFβRⅡ-Fc4H4。