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摘要目的：检测miR-145、RCAN3在宫颈癌细胞中的表达并探究其对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。<br>　　方法：<br>　　1.从TCGA和GTEX数据库下载了13份健康对照数据和306份宫颈鳞癌组织数据，分析RCAN3在宫颈鳞癌组织中的表达情况；根据表达中位值将患者分为RCAN3高表达组和低表达组，采用Kaplan-Meier生存分析法分析高表达组和低表达组的生存率；为研究RCAN3是否能作为作为宫颈鳞癌预后的独立预测因素，对样本进行Cox回归分析。<br>　　2.利用miRNA靶基因预测位点miRBase和TargetScan寻找RCAN3的重要调控基因，用双荧光素酶报告实验验证miR-145是否是RCAN3的上游调节分子；采用生物信息学分析miR-145在宫颈鳞癌组织中的表达情况及其对生存的影响；用qRT-PCR方法检测miR-145在不同人宫颈癌细胞系（CaSki，HeLa和C-33A）和人宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7的表达情况；为了更好地进行功能性实验，我们选择表达量相对较高的CaSki进行敲除实验，选择表达量相对较低的C-33A进行过表达实验，用Westernblot实验检测上调/下调miR-145对RCAN3蛋白表达水平的变化。<br>　　3.在C-33A细胞中，采用CCK-8和集落形成实验分别检测miR-145mimic组、pc-DNA3.1-RCAN3组以及pc-DNA3.1-RCAN3+miR-145mimic组细胞增殖的变化，Transwell分析各组细胞侵袭及迁移的变化；在CaSki细胞中，采用CCK-8和集落形成实验分别检测miR-145inhibitor组、si-RCAN3组以及si-RCAN3+miR-145inhibitor组细胞增殖的变化，Transwell分析各组细胞侵袭及迁移的变化。<br>　　结果：<br>　　1.RCAN3在宫颈鳞癌组织中高表达（3.37±0.32vs2.21±0.12，Plt;0.0001）；RCAN3低表达组的5年OS明显高于高表达组（72.1%vs60.0%，P＜0.05）；单因素分析表明，RCAN3的表达、临床分期、病理-T、病理-M和病理-N可作为宫颈鳞癌的预后因素。多因素分析显示，只有病理性T可作为宫颈鳞癌的独立预后因子。<br>　　2.miR-145是RCAN3的一个调控基因；miR-145在宫颈鳞癌组织中的表达明显下降（0.35±0.21vs0.52±0.12，Plt;0.0001），且miR-145低表达者5年OS明显降低（57.5%vs74.3%，Plt;0.05）；临床分期Ⅲ-Ⅳ期、肿瘤≥4cm、淋巴结转移和高危HPV感染的宫颈鳞癌患者miR-145表达水平较低（Plt;0.05，Plt;0.05，Plt;0.05，Plt;0.05）；miR-145在人宫颈癌细胞系（CaSki，HeLa和C-33A）的表达明显低于人宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01）；上调miR-145显著降低WT-RCAN3载体中荧光素酶的活性（0.16±0.03vs0.41±0.04，Plt;0.01）和C-33A细胞中RCAN3的蛋白表达（0.63±0.07vs2.19±0.14，Plt;0.01），而下调miR-145则可显著增强荧光素酶活性（0.64±0.07vs0.41±0.04，Plt;0.01）和CaSki细胞中RCAN3的蛋白表达（8.34±0.72vs2.22±0.11，Plt;0.01）。<br>　　3.在C-33A细胞中，miR-145mimic组细胞增殖、侵袭、迁移数目减少（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01），pcDNA3.1-RCAN3组细胞增殖、侵袭、迁移数目增多（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01），而miR-145mimic+pcDNA3.1-RCAN3组可部分逆转pcDNA3.1-RCAN3组所致的促进作用（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01）；在CaSki细胞中，miR-145inhibitor组细胞增殖、侵袭、迁移数目增多（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01），si-RCAN3组细胞增殖、侵袭、迁移数目减少（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01），而miR-145inhibitor+si-RCAN3组可部分逆转si-RCAN3组所致的抑制作用（Plt;0.01，Plt;0.01，Plt;0.01）。<br>　　结论：<br>　　1.RCAN3在宫颈鳞癌组织中高表达，且高表达者预后差。2.miR-145在宫颈鳞癌组织中低表达，且低表达者预后差。<br>　　3.miR-145可与RCAN3特异性结合，且靶向负调控RCAN3蛋白的表达。<br>　　4.上调miR-145表达可部分逆转上调RCAN3表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的促进作用。<br>　　5.下调miR-145表达可部分逆转下调RCAN3表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的抑制作用。