检索历史 清除

摘要目的：探讨糖酵解与肺巨噬细胞极化改变在大鼠低氧性肺动脉高压肺血管重塑中的作用及17β-雌二醇（E2）的肺血管保护机制。<br>　　方法：<br>　　1．动物水平：将30只健康雌性SD大鼠按随机数字表法平均分为5组（各组n=6）：去势+常氧组、去势+常氧+E2组、去势+低氧组、去势+低氧+E2组、去势+低氧+二氯乙酸盐（DCA）组。全部大鼠行卵巢切除术去势；去势+常氧+E2组、去势+低氧+E2组每日皮下注射E220ug/kg，其余组大鼠每日予以生理盐水0.1ml皮下注射；去势+低氧+DCA组每日给予DCA80mg/kg灌胃，其余组大鼠每日予以相同容积的生理盐水灌胃。低氧组大鼠置于低氧环境下饲养，常氧组大鼠呼吸正常空气，连续饲养8周建立低氧性肺动脉高压模型。测量平均肺动脉压（mPAP）、右心室肥厚指数（RVHI），并观察肺小血管形态学改变。用免疫荧光法鉴定巨噬细胞标志物NOS2及CD206，实时聚合酶链式反应（PCR）及免疫印迹法测定肺组织NOS2及CD206表达水平，试剂盒法测定肺组织乳酸水平。<br>　　2．细胞水平：体外培养大鼠肺巨噬细胞NR8383，并随机分为4组：常氧组、低氧组、低氧+E2（10-8mol/L）组、低氧+DCA（10mmol/L）组。培养24小时后，免疫荧光法鉴定巨噬细胞标志物NOS2及CD206，PCR及免疫印迹法测定巨噬细胞NOS2及CD206表达水平，试剂盒法测定上清液乳酸水平。<br>　　结果：<br>　　1.动物水平：与去势+常氧组相比，低氧条件下的各组大鼠mPAP、RVHI均明显增加，肺小动脉管壁增厚，管腔变窄，肺组织巨噬细胞浸润更为显著，NOS2、CD206及乳酸表达水平明显升高（P均lt;0.01）；与去势+低氧组相比，去势+低氧+E2组、去势+低氧+DCA组肺小血管形态学改变相对较轻，NOS2表达明显下降，CD206表达明显上升，乳酸水平明显下降（P均lt;0.01）；去势+低氧+DCA组较去势+低氧+E2组上述指标变化更为显著（P均lt;0.01）；去势+常氧+E2组上述指标与去势+常氧组相比，差异无统计学意义（P均gt;0.05）。<br>　　2.细胞水平：与常氧组相比，低氧条件下的各组巨噬细胞增殖明显，NOS2、CD206及上清液乳酸表达水平明显升高（P均lt;0.01）；与低氧组相比，低氧+E2组、低氧+DCA组巨噬细胞增殖程度减轻，NOS2表达明显下降，CD206表达明显上升，上清液乳酸水平明显下降（P均lt;0.01）；低氧+DCA组较低氧+E2组上述指标变化更为显著（P均lt;0.01）。<br>　　结论：<br>　　慢性低氧环境下，巨噬细胞通过上调自身糖酵解水平，调控细胞极化表型，参与低氧性肺动脉高压肺血管重塑。17β-雌二醇可能通过降低巨噬细胞糖酵解水平，促进巨噬细胞向M2型方向极化，改善低氧性肺动脉高压肺血管重塑。