摘要哈蟆油是我国的一种传统中药材,具有“补肾益精,养阴润肺”的功效。哈蟆油水提物是哈蟆油超声破碎离心后得到的产物,其主要成分是哈蟆油多肽,是哈蟆油的重要成分之一。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分,有着诱导细胞或动物体产生炎症反应的作用,常被用于诱导肾小球内脏上皮细胞的炎症反应。本论文旨在通过使用不同浓度的哈蟆油水提物溶液对LPS诱导的肾炎小鼠进行灌胃饲养,观察小鼠炎症因子、抗氧化指标等的变化,为揭示哈蟆油对肾脏炎症的保护作用提供科学依据。<br> 选取出生日期和体重相近的雌、雄昆明小鼠各42只,每种性别小鼠均设置6个组,共计12组,即哈蟆油水提物高、中、低剂量组简称油高、油中、油低组;空白对照组;阳性对照组;模型组,每组7只。每组小鼠于每天固定时间进行灌胃,饲喂相同日粮,保证饲料和饮水充足。每组使用不同浓度的哈蟆油水提物溶液灌胃14d,每日灌胃后对采食量、体重变化进行记录,随后LPS腹腔注射处理3h(空白对照组除外)后进行采血、解剖采样,并使用采得的组织、血清等进行炎症因子、抗氧化指标、炎症相关基因表达能力、肾脏组织炎症变化等相关指标的分析。<br> 小鼠饲养试验结果显示:随着浓度的提高,哈蟆油水提物能够加快小鼠的生长速度;能够使雄性小鼠高剂量组采食量显著升高(P<0.05),其余各组小鼠采食量均有不同程度提高但差异不显著(P>0.05)。<br> 小鼠血清中炎症因子、免疫因子测定结果显示:与对照组相比,LPS能够显著提高炎症因子IL-6、IL-1β和IFN-γ含量,并使免疫球蛋白IgG含量显著升高(P<0.05),能够提高免疫球蛋白IgA含量但差异不显著(P>0.05);与模型组相比,灌胃哈蟆油水提物能够显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和IFN-γ含量,并使免疫球蛋白IgG含量显著降低(P<0.05)能够降低免疫球蛋白IgA含量但差异不显著(P>0.05)。<br> 对肾脏及肝脏组织中炎症相关基因表达能力的检测得出雌、雄小鼠均具有以下结果:与模型组相比,LPS能够显著提高雌雄小鼠肾脏炎症相关基因NLRP3、NLRP1a、IL-1β的相对表达量(P<0.05)。<br> 肾脏组织匀浆中抗氧化指标的检测结果显示:与对照组相比,LPS能够显著上调小鼠肾脏内NO浓度和SOD、CAT的水平(P<0.05);与模型组相比,灌胃哈蟆油水提物能够显著降低肾脏内NO浓度和SOD、CAT的水平(P<0.05)。<br> 雌、雄小鼠肾脏组织学研究结果如下:与对照组相比,模型组注射LPS能够导致肾小球中的系膜细胞增生、肾小管出现浑浊;与模型组相比,阳性组能够有效的缓解肾小球中系膜细胞增生以及肾小管的浑浊程度;与模型组相比,灌胃不同浓度的哈蟆油水提物均对肾小球中系膜细胞增生以及肾小管的浑浊程度有一定的缓解作用,其中哈蟆油水提物低剂量组作用最明显。<br> 综上,哈蟆油水提物对LPS诱导的雌、雄小鼠肾炎均具有保护作用,但是因为性别不同最佳保护浓度也不同,对雄性肾炎小鼠最佳保护浓度为150mg/kg或75mg/kg,雌性肾炎小鼠的最佳浓度为25mg/kg。
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