摘要鱼腥草属于三白草科植物蕺菜,是药食同源植物,具有抗菌、止咳、消炎等功效,这与其多糖成分密切相关。本文采用化学分析方法(酸水解、羰基还原、甲基化反应)和仪器分析手段(UV、FT-IR、HPGPC、GC、GC-MS、NMR),表征鱼腥草多糖的结构,同时通过体外实验分析鱼腥草多糖的抗炎活性。研究结果主要如下:<br> 采用热水、0.05mol/LEDTA-2Na溶液、0.2mol/L氢氧化钠溶液、1mol/L氢氧化钠溶液对鱼腥草进行顺序提取,得了四个多糖组分HBHP、CHHP、DAHP、CAHP。化学组成分析表明四个组分糖含量分别为66.4%、63.2%、60.6%、62.8%,糖醛酸含量分别为29.6%、22.6%、18.5%、11.6%。单糖组成结果表明HBHP和CHHP由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比分别为9.7∶11.9∶10.6∶21.4和11.3∶17.8∶7.6∶18.9,DAHP和CAHP由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比分别为14.1∶17.0∶9.0∶13.8和6.6∶37.5∶9.9∶6.3。扫描电镜结果表明HBHP、CHHP、DAHP的比表面积较大。热重分析表明CAHP的热稳定性最好。<br> 采用DEAECellulose-52对HBHP进一步纯化得到均一多糖HBHP-3和HBHP-4,分子量分别为397.4kDa、616.7kDa,糖醛酸含量分别为20.9%、14.8%。单糖组成结果表明HBHP-3和HBHP-4中鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸的摩尔比分别为16.0∶12.6∶4.6∶18.1∶15.6和34.1∶6.9∶5.0∶16.2∶10.0。结构分析表明HBHP-3的主链由→2)-α-D-Rhap-(1→、→4)-α-D-GalpA-(1→、→4)-β-D-Galp-(1→组成,在→2)-α-D-Rhap-(1→的O-4位连有支链α-L-Araf-(1→、→5)-α-L-Araf-(1→、→4)-α-D-Glcp-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→、β-D-Galp-(1→。HBHP-4的主链由→2)-α-D-Rhap-(1→、→4)-α-D-GalpA-(1→、→4)-β-D-Galp-(1→组成,在→2)-α-D-Rhap-(1→的O-4位连接支链α-L-Araf-(1→、→4)-α-D-Glcp-(1→、β-D-Galp-(1→。<br> 抗氧化活性研究表明,在测定的浓度范围内,鱼腥草多糖呈现较好抗氧化活性,其中HBHP的羟自由基和DPPH自由基清除活性最好,而DAHP的ABTS自由基清除活性和Fe2+螯合能力最好。免疫调节分析表明四个组分均具有较好的免疫调节活性,并与多糖浓度呈现正相关,其中HBHP对巨噬细胞的活化效果最明显,显著提高了细胞吞噬作用。抗炎研究结果表明,在5-100μg/mL浓度范围内,HBHP-3和HBHP-4抑制NO的分泌、降低促炎因子的mRNA表达量,并呈现剂量依赖性,说明HBHP-3和HBHP-4对LPS诱导的细胞炎症反应具有明显的抑制效果。Western-blot分析表明HBHP-3通过抑制NF-κB蛋白(p65)和IκBα磷酸化水平来发挥抗炎活性。
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