摘要PPR蛋白(Pentatricopeptiderepeatprotein)是一大类序列特异性RNA结合蛋白,广泛分布于陆生植物的叶绿体和线粒体中。PPR蛋白在细胞器RNA代谢过程中发挥功能。拟南芥基因组编码至少500个PPR蛋白。PPR蛋白家族分为两大类,包括P型亚家族和PLS型亚家族。通常,PLS亚家族蛋白主要参与线粒体和叶绿体转录本的RNA编辑,而大多数分析的P亚家族蛋白主要涉及RNA代谢,比如RNA的稳定和加工、剪接和翻译。PPR蛋白通常以一种可被预测的方式特异性地识别RNA序列,通过在每个PPR基序的第5和最后一个位置的关键氨基酸结合到单个的核糖核苷酸。PPR基因突变通常会导致胚胎发生和幼苗发育缺陷表型的改变,但目前只有少数PPR突变体被详细描述。<br> 本研究中,我们得到了一个拟南芥黄化致死((y)ellowand(l)ethal)突变体yl,突变体的表型为植株黄化,苗期致死。它在幼苗时期表现出子叶黄化并致死的表型,可以通过在生长培养基中添加蔗糖来部分挽救。利用反向遗传学方法和分子生物学手段,对yl突变体进行研究,取得如下的主要结果和结论:<br> (1)通过TADEA-PCR的技术手段克隆了yl突变体中T-DNA的插入位点,发现两个相邻的基因AT3G53690和AT3G53700的序列发生了大片段的缺失。<br> (2)遗传分析和互补实验确认了是AT3G53700的突变导致了yl的突变表型。<br> (3)AT3G53700编码一个定位于线粒体且具有17个PPR基序的PLS亚家族蛋白MEE40(MATERNALEFFECTEMBRYOARREST40)。序列比对及同源性分析表明MEE40在不同物种中均有其同源蛋白,进化上比较保守。<br> (4)基于野生型和yl突变体植株的转录组数据对差异表达基因进行了初步分析。AT3G53700可能参与线粒体基因表达的多种调控过程,其中的分子机理还需进一步探究。
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