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摘要目的：系统分析大果飞蛾藤的主要化学成分，基于网络药理学预测大果飞蛾藤治疗类风湿关节炎（RA）的潜在活性成分和关键通路，最后通过体内动物实验验证大果飞蛾藤对类风湿关节炎大鼠模型的药效及作用机制，旨在探究大果飞蛾藤作为丁公藤替代品的可行性，为临床应用的安全性和有效性提供理论依据。<br>　　方法：1.采用80%甲醇提取大果飞蛾藤作为供试品溶液，应用ThermoAccucoreaQC18色谱柱（4.6mm×100mm,3.5μm），流动相为0.1%的甲酸水溶液（A）和甲醇（B），洗脱程序：0~12min，5~25%B；12~20min，25~38%B。在正负离子模式下对大果飞蛾藤进行了分析，扫描范围m/z100~1200。<br>　　2.以鉴定出的大果飞蛾藤化学成分为基础，通过TCMSP、SwissTargetPrediction预测化合物的靶点，将预测的靶点整合后导入Uniprot数据库得到基因名称，然后按照将靶点与数据库（GeneCards、OMIM、TTD和DrugBank）获得的RA靶点相互映射，筛选大果飞蛾藤治疗RA的潜在靶点信息，应用Cytoscape3.7.1构建成分-靶点-疾病（C-T-D）网络图，将潜在靶点导入STRING数据库得到蛋白-蛋白互作图（PPI）并进行KEGG富集分析，最后通过汇总成分、靶点和20条通路信息制作成分-靶点-通路（C-T-P）网络图，并进行拓扑分析筛选关键靶点、成分和通路。<br>　　3.建立佐剂型大鼠关节炎模型，将48只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、甲氨蝶呤组和大果飞蛾藤高、中、低剂量组，治疗组每日灌胃一次，甲氨蝶呤组每3天灌胃一次，持续17天，每隔四天测量一次后爪脚踝周长并记录大鼠关节炎指数。采用HE染色法进行组织病理学检查，ELISA法用于测定IL-6和HIF-1α的含量，PCR和Westernblot实验用于评估PI3K、AKT和HIF-1α的mRNA水平和蛋白表达水平。<br>　　结果：1.通过高分辨率质谱分析得到大果飞蛾藤21种化学成分，其中包含7种香豆素，7种绿原酸，1个莨菪烷，2个酰胺，1个类黄酮，1个木脂素和2个其他化合物。<br>　　2.网络药理学结果显示，大果飞蛾藤中的5种重要化合物如七叶内酯、伞形花内酯、N-反式-阿魏酰酪胺、咖啡酸、东莨菪素在治疗RA的过程中发挥了关键性作用，KEGG富集分析和C-T-P网络图结果发现HIF-1signalingpathway和PI3K-Aktsignalingpathway可能是大果飞蛾藤治疗RA的重要通路。另外，大果飞蛾藤可能通过调节MAP2K1、RPS6KB1、MTOR、NFκB1、PIK3CA、PIK3CB、PDGFRB、IGF1R、AKT1、PRKCB、PRKACA、HSP90AA1、CDKN1A、CASP3、PRKCA、KDR、SRC、GSK3B、EGFR、MAPK1、TNF、CDK2、CDK4、CCND1、PTGS2来治疗RA。<br>　　3.动物实验中组织病理学检查发现甲氨蝶呤和大果飞蛾藤能明显减少滑膜增生和软骨降解，且高剂量下效果明显。模型组HIF-1α和IL-6水平显著升高（P＜0.01），大果飞蛾藤高剂量组HIF-1α（P＜0.05）和IL-6（P＜0.01）水平显著降低。与模型对照组相比，大果飞蛾藤高剂量组显著降低了HIF-1α、PI3K和AKT的mRNA水平（P＜0.05）。与模型对照组比较，大果飞蛾藤高剂量组的PI3K、AKT、p-AKT和HIF-1α蛋白水平明显低于模型组（P＜0.05）。<br>　　结论：大果飞蛾藤在佐剂型大鼠关节炎模型中表现出良好的治疗效果，并佐证了网络药理学的机制通路结果，表明其可能通过多组分、多靶点的作用机制发挥药效，本实验为大果飞蛾藤作为丁公藤的替代品可行性提供了实验依据，确保其临床应用的安全性和有效性。