摘要目的:<br> 观察黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASIV)对射血分数保留型心力衰竭(Ejection FractionRetention Heart Failure,EFpHF)模型大鼠的心脏功能保护及心脏微血管及炎症因子的影响,为探讨黄芪甲苷治疗EFpHF提供可靠的实验依据。<br> 方法:<br> 1.实验分组、模型制备及药物干预<br> 1.1 实验分组<br> 随机将25只SPF级雄性盐敏感(Dahl-ss)大鼠分为:正常对照组(Control组)、模型组(Model组)及低、中、高剂量ASIV组,各组5只。<br> 1.2 模型制备<br> Model组采用8%NaCl高盐饲料喂养8周,当LVEF≥50%,BNP>100pg/ml,NT-ProBNP>300pg/ml,心率增快,则提示模型制备成功。<br> 1.3 药物干预<br> ASIV加入去离子水搅拌均匀,配置为浓度2.5g/ml药液,药物配置成功后置于4℃冰箱冷藏;EFpHF模型制备成功后,低、中、高剂量ASIV组分别按10、20、40mg/kg的ASIV的2.5ml/d灌胃疗8周。Control组采用0.3%NaCl饲料喂养8周。<br> 2.实验方法及观察指标<br> 2.1 超声心动图:检测LVEF;<br> 2.2 心电图:检测心率、P波、PR间期、T波;<br> 2.3 Elisa法:检测血清BNP及NT-ProBNP水平;<br> 2.4 HE染色法:检测心肌组织形态;<br> 2.5 Masson染色法:检测心肌组织胶原纤维增生;<br> 2.6 免疫荧光法:检测心肌组织CD31、vWF的定位和表达;<br> 2.7 免疫组织化学法:检测心肌组织VEGF、TNF-α和IL-6的定位和表达。<br> 结果:<br> 1.实验大鼠超声心动图、心电图及血清BNP、NT-ProBNP水平<br> 1.1 超声心动图:与Control组相比,Model组大鼠LVEF值明显降低(P<0.05);与Model组相比,低、中、高剂量ASIV组大鼠LVEF均值显著升高(P<0.05)。<br> 1.2 心电图:与Control组相比,Model组大鼠心率加快,P波振幅增大,PR间期时长缩短,T波振幅减小;与Model组相,低、中、高剂量ASIV组大鼠心率减慢,差异具有统计学意义(P<0.05),且高剂量ASIV组效果最佳。<br> 1.3 血清BNP和NT-ProBNP水平:与Control组相比,Model组大鼠血清BNP和NT-ProBNP显著升高(P<0.05);较Model组,低、中、高剂量ASIV组大鼠血清BNP和NT-ProBNP均降低,差异具有统计学意义(P<0.05),且剂量越大,降低越明显。<br> 2.心肌组织HE染色<br> 与Control组比较,Model组心肌细胞排列紊乱,血管壁结构紊乱,薄厚不一,心肌纤维大部分可见断裂、溶解;血管病变严重,血管基底膜增厚。与Model组相比,低、中、高剂量ASIV组的心肌细胞排列较整齐,心肌细胞大小基本一致,血管壁结构完整规则,薄厚均一,血管环状形态相对规整。<br> 3.心肌组织Masson染色<br> 与Model组相比,低、中、高剂量ASIV组大鼠心肌细胞质中胶原纤维呈分支状排列,血管周围胶原纤维堆积程度减轻,心肌纤维化程度显著减缓,差异均具有统计学意义(P<0.05),且高剂量组ASIV组效果最佳。<br> 4.心肌组织VEGF免疫组织化学染色<br> 各实验组大鼠心肌组织中的微血管壁周围可见VEGF蛋白表达,与Control组相比,Model组黄褐色颗粒显著减少,VEGF表达量显著降低(P<0.05);与Model组相比,低、中、高ASIV组VEGF的蛋白表达呈现递增趋势,有统计学差异(P<0.05)。<br> 5.心肌组织CD31免疫荧光染色<br> 各实验组大鼠心肌组织中的微血管内皮细胞均可见绿色CD31的表达,Model组CD31表达量显著下降,与Control组相比有统计学意义(P<0.05);与Model组相比低、中、高剂量ASIV组CD31表达均明显增加(P<0.05),且随ASIV剂量的增加CD31表达量呈递增趋势。<br> 6.心肌组织vWF免疫荧光染色<br> vWF的阳性表达位于心肌血管内皮细胞,成绿色。与Control组相比,Model组vWF蛋白表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与Model组相比,低、中、高剂量ASIV组均可下调大鼠vWF蛋白表达,差异均具有统计学意义(P<0.05),但是高剂量组ASIV组治疗效果最佳。<br> 7.心肌组织TNF-α和IL-6免疫组织化学染色<br> TNF-α和IL-6的阳性表达位于心肌血管内皮细胞,成黄褐色。与Control组相比,Model组黄褐色颗粒显著增加,TNF-α和IL-6蛋白表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);较Model组相比,低、中、高剂量组TNF-α和IL-6蛋白呈现不同程度的下降,差异均具有统计学意义(P<0.05),但是高剂量ASTV组疗效最佳。<br> 结论:<br> 1.低、中、高剂量ASIV组均可明显提高大鼠LVEF值,减慢大鼠心率,降低血清BNP和NT-ProBNP水平,从而改善心脏功能,且成剂量依赖性,且40mg/kg/d为最佳剂量。<br> 2.ASIV改善HFpEF大鼠心脏功能,缓解心衰的机制可能与抑制心肌组织炎性反应,改善心肌微血管功能和心肌损伤有关。
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