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摘要RNA结合蛋白（RNA-bindingproteins，RBPs）在转录后阶段多个水平上调节RNA的命运，包括选择性剪接、mRNA的稳定性、mRNA的亚细胞定位和翻译效率等。RNA结合蛋白中发现最多、研究最清楚的是含RNA识别基序（RNARecognitionMotif,RRM）的RNA结合蛋白，RRM型RNA结合蛋白广泛存在于动物、植物、真菌和细菌细胞中，是进化保守、功能重要的一类蛋白。本文重点研究了两个RRM型RNA结合蛋白家族：Msi（Musashi）家族和Celf（Cugbp,Elav-likefamily）家族的部分基因。<br>　　Msi家族基因一般在干细胞表达，调控干细胞的增殖和分化，并且和多种肿瘤的发生有关系。Celf家族则在心脏、骨骼肌和神经系统中有表达，调节选择性剪接、mRNA的翻译或者稳定性，和心脏、肌肉、神经系统的部分疾病有所联系。斑马鱼是发育遗传学研究的模式生物，其基因组测序已经完成，极大方便了基因功能的研究。然而，对于斑马鱼Msi家族的msi2a基因和Celf家族的celf3-6亚家族6个基因（celf3a、celf3b、celf4、celf5a、celf5b、celf6）的研究却很少，故本文对它们的表达模式和基因功能进行了初步的探究。<br>　　序列比对和系统进化分析发现斑马鱼msi2a基因和celf3-6基因氨基酸序列都与其它脊椎动物物种有很高的一致性，并且在进化中保守，说明mai2a和celf3-6可能在脊椎动物中有保守的功能。整体胚胎原位杂交结果显示，msi2a在早期呈现母源性的泛表达模式，直到18体节时期开始特异的表达在头盖神经节、脑的前部和尾部区域，发育至受精一天之后则主要表达在脑部特定区域。实时荧光定量PCR和原位杂交结果表明，celf3-6亚家族6个基因具有各自独特的表达图谱，但它们又都在发育早期泛表达，受精后一天之后表达则呈现特异表达的模式，主要在中枢神经系统中特异表达，并且它们在成体的脑和眼中都有较高水平的表达。这也支持了celf3-6亚家族可能在神经系统的发育以及功能上有重要作用的观点。<br>　　而后，本论文对比较感兴趣的msi2a基因的功能进行了探究。Morpholino敲降msi2a会导致体轴变短、尾巴向内卷曲的胚胎发育缺陷，并且发育缺陷可以被过表达msi2a所恢复。敲降实验的结果还表明msi2a调控斑马鱼的原始造血过程；永久造血过程中造血干细胞的生成不需要msi2a的参与，但是msi2a对于造血干细胞的生存和维持是必要的。本文利用TALEN技术构建了斑马鱼msi2a基因敲除突变体，目前尚未发现F2代突变体具有肉眼可见的表型，纯合突变体的造血是否受到影响等相关的实验和分析仍在进行中。本文对于斑马鱼msi2a基因在造血过程中功能的研究，有利于揭示哺乳动物Msi2基因的功能，并有助于人类血液疾病治疗的研究。<br>　　总之，本论文确定了msi2a基因和celf3-6亚家族基因的时空表达图谱，并初步探究了msi2a基因的功能。本文的研究有助于阐明Msi家族和Celf家族的功能，加深对RNA结合蛋白的了解，并为多种人类疾病的发病机理和疾病治疗的研究提供帮助。