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虎纹蛙表型变异的温度和芳香化酶抑制剂影响及性腺转录组学分析

摘要当前受全球气候变暖和人类活动等的影响,自然环境发生改变,两栖动物的表型可塑性极易被环境影响,同时也受到基因型的调控。据此,本研究提出以下科学问题:在变化的环境下,两栖动物的表型特征是否会发生变异?会发生怎样的变异?对整个种群是否会产生影响?基因如何对其表型可塑性进行调控?<br>  为解决上述问题,本文选取了对两栖动物表型影响较大的环境因子(温度、类固醇激素)进行实验,进一步了解环境对两栖动物表型可塑性的影响,同时选取较为直观的性别表型进行转录组分析,探究分子水平上两栖动物表型可塑性发生的机制。虎纹蛙(Hoplobatrachusrugulosus)在我国的分布范围较广,具有重要的保护价值和经济价值。故本研究以虎纹蛙为实验对象开展了相关实验,得到如下结果:<br>  温度因子的实验中发现:(1)温度过低会影响虎纹蛙蝌蚪的变态率和存活率,并不利于虎纹蛙蝌蚪的生长发育,但低温下能产出更多个头较大的个体,且对于虎纹蛙来说,24℃已经属于低温环境。(2)温度越高,虎纹蛙蝌蚪发育成幼蛙的个体越小,变态时间越短,但29℃环境下发育的蝌蚪,生长和繁殖表现都更具有优势。(3)高温会影响虎纹蛙的性腺发育,导致虎纹蛙的性比偏雄,雌雄个体的体积存在二态性,雌性个体总是大于雄性个体。(4)虎纹蛙的发育温度在温和及偏高的时候对其后代影响并不显著,但是温度偏低会影响到虎纹蛙的繁殖,使其在繁殖期不能成功繁育后代。<br>  温度×芳香化酶抑制剂(来曲唑)的两因子实验中发现:(1)34℃能加速虎纹蛙蝌蚪的生长发育,缩短变态时间,而29℃下饲养的蝌蚪虽然生长缓慢,但变态后的幼蛙具有较大的个体;来曲唑浓度、温度与来曲唑的交互作用对这些变量则无影响。(2)变态后虎纹蛙幼蛙的跳跃距离与肥满度呈正相关,在控制肥满度时,跳跃距离不受温度、来曲唑浓度及其交互作用的影响。(3)对照组(0mg/g来曲唑)在29℃时性比为1:1,在34℃时雄性较多。在来曲唑处理组中,在29℃和34℃环境下雄性比例均有显著偏倚,且雄性比随来曲唑浓度的增加而增加。此外,在每个来曲唑浓度下,34℃也比29℃产生更多的雄性。<br>  虎纹蛙性腺转录组测序分析中发现:(1)不同性腺的基因表达存在显著差异。与卵巢相比,睾丸在发育过程中有更多的基因上调。(2)与雌性未成熟的卵巢相比,成熟卵巢有更多的基因参与表达;而在睾丸发育早期则有更多的基因上调。(3)类固醇激素在虎纹蛙性腺发育中具有重要的作用,根据GO和KEGG差异基因富集分析,本研究确定了类固醇在性腺发育过程中的主要调控途径,揭示了cyp17α、hsd3β、hsd11β1、cyp19α和hsd17β12通过调控类固醇激素参与了虎纹蛙性腺发育过程。(4)cyp3α、cyp17α、hsd3β、hsd11β1、sox2、sox9、sox30、soat、cyp19α、hsd17β12和hspα1s都和性腺的发育和分化有关。<br>  综上所述,虎纹蛙个体的生长发育受温度的影响较大,而其性别发育则会受到环境温度和类固醇激素的影响,说明当今全球变暖和环境污染的进一步加剧会对虎纹蛙的种群造成极大影响,甚至可能会造成物种灭绝。因此,加大对全球气候变暖的关注,以及防治环境污染的工作刻不容缓。此外在分子水平上,也证实了类固醇激素在性腺发育中的重要作用,根据本研究得出的结果,可深入对所得基因进行进一步研究,探索性别发育及性腺分化过程中更具体的分子机制,细化基因作用,为该领域的进一步研究奠定基础。

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导师 林植华
发布时间 2022-04-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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