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摘要背景：肠屏障损伤与溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）的发病机制密切相关，其中，肠上皮屏障是肠屏障最重要的组成成分，而紧密连接在肠上皮屏障中发挥着重大作用。紧密连接蛋白是形成紧密连接的主干，由跨膜蛋白Occludin、Claudins、胞内支架蛋白ZO、连接粘附分子JAM等蛋白组成，细胞因子在紧密连接的调控中起着重要作用，包括有白细胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）等。而白细胞介素-22（Interleukin-22，IL-22）作为2000年发现的与IL-10相关的一种新型细胞因子，长期以来被认为是UC组织修复的重要介质，研究发现，IL-22能通过活化STAT3通路在UC中起保护作用，主要表现为修复黏膜创口、阻止肠腔菌群移位和刺激肠上皮细胞、潘氏细胞分泌多种抗菌肽等，但其对肠上皮屏障中紧密连接的影响及机制尚不明确。为此我们进行了本次研究，因为研究肠上皮屏障紧密连接需要体外构建单层肠上皮屏障模型，人结肠癌HT29细胞株（后文简称HT29细胞）具有形成融合性单层上皮潜能，故选用HT29细胞。<br>　　目的：探讨IL-22对HT29细胞的紧密连接蛋白表达的影响及其是否通过STAT3通路参与调控，有助于更全面的了解IL-22在肠上皮屏障功能调节中的作用，为寻找治疗UC的新药物提供理论依据。<br>　　方法：将HT29细胞分为对照组、IL-22组（100ng/ml的IL-22）、FLLL32组（IL-22干预前使用STAT3通路抑制剂FLLL32预处理）、Colivelin组（IL-22干预前使用STAT3通路激活剂Colivelin预处理）、shNC组（感染阴性对照病毒）、shNC+IL-22组（IL-22干预前感染阴性对照病毒）、shSTAT3<br>　　组（感染LV-STAT3-RNAi病毒）、shSTAT3+IL-22组（IL-22干预前感染LV-STAT3-RNAi病毒）。采用Westernblot、Real-timePCR检测以上各组HT29细胞STAT3、磷酸化STAT3（phospho-STAT3，P-STAT3）和紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2及其mRNA的表达；采用透射电镜观察各组HT29细胞紧密连接结构变化。<br>　　结果：1、与对照组相比，IL-22组STAT3、P-STAT3、ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2的蛋白及mRNA表达水平升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；电镜下可观察到，相比于对照组，IL-22组的紧密连接更致密，细胞间间隙较狭窄。2、相比于IL-22组，FLLL32组STAT3、P-STAT3、ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2的蛋白及mRNA表达量下调（P＜0.05），紧密连接较差；相比于IL-22组，Colivelin组STAT3和P-STAT3表达量增加（P＜0.05），紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2及其mRNA表达水平上调（P＜0.05），电镜下观测到相比于IL-22组，Colivelin组紧密连接更致密，细胞间间隙较狭窄。3、相比于shNC组，shSTAT3组STAT3的mRNA及蛋白表达量下调（P＜0.05）；相比于shNC+IL-22组，shSTAT3+IL-22组P-STAT3的蛋白表达量下调（P＜0.05）。与shNC组相比，shNC+IL-22组的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2及其mRNA表达量增加（P＜0.05），电镜下观测到紧密连接更致密，细胞间间隙更狭窄。而相比于shSTAT3组，shSTAT3+IL-22组的所有紧密连接的蛋白及mRNA表达量均无明显差异，细胞间间隙也无明显差异。shNC+IL-22组的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2及mRNA表达量较shNC组增加（P＜0.05），紧密连接结构更致密；而相比于shSTAT3组，shSTAT3+IL-22组的所有紧密连接的蛋白及mRNA表达量均无明显差异。<br>　　结论：1、IL-22可上调HT29细胞的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2的表达。2、STAT3通路参与IL-22上调HT29细胞的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1和Claudin-2的表达。