摘要目的:联合肝实质分隔和门静脉结扎的二步肝切除术(associatingliverpartitionandportalveinligationforstagedhepatectomy,ALPPS)能极大的加快肝脏的再生,本研究主要探讨ALPPS术后肝脏不同类型细胞与肝再生的关系,为阐明ALPPS相关肝再生机制提供依据。<br> 方法:回顾分析2018年1月至2020年6月期间于广西医科大学第一附属医院肝胆外科行ALPPS治疗的肝癌患者,收集患者的临床数据资料,并且收取所需的肝脏组织学标本。对临床资料进行初步的汇总和统计分析,筛选出26例完成了ALPPS-Ⅱ期手术的合适的病例。应用多色标记免疫荧光染色技术及多光谱成像技术对ALPPS患者的Ⅰ期和Ⅱ期的再生侧肝脏组织的各种种类的细胞进行定量分析,检测的时间点包括ALPPSⅠ期开腹的左肝,Ⅰ期关腹的左肝以及Ⅱ期开腹的左肝。检测的肝脏细胞种类包括肝细胞(Hepatocytes),胆管上皮细胞(Biliaryepithelialcells,BEC),肝干细胞(Liverstemcells,LSC),肝星型细胞(Hepaticstellatecells,HSC),肝窦内皮细胞(Liversinusoidalendothelialcells,LSEC),库普弗细胞(Kupffercells),陷窝细胞(Pitcells)以及与肝细胞再生相关的增殖抗原Ki67和SOX9标记。分析这9种细胞在三个不同时间点下的变化趋势。然后根据ALPPS-Ⅰ期术后约14天内复查的影像学资料,并且测算剩余肝脏体积达到了Ⅱ期手术的标准。通过公式计算其每天的动态增生率(kineticgrowthrate,KGR)。以KGR中位数为界将其分为高低KGR两组,进一步分析不同类型细胞在高低KGR两组的表达情况。<br> 结果:ALPPS-Ⅰ期开腹和ALPPS-I期关腹之间的各种肝脏细胞阳性表达率的比较,窦内皮细胞降低明显,差异具有统计学显著性(P=0.026),其余细胞的变化没有显著差异。ALPPS-Ⅰ期关腹与ALPPS-Ⅱ期比较,库普弗细胞在Ⅱ期的时候呈现增高的趋势,差异具有统计学显著性(P=0.036)。另外Ki67标记的细胞,在ALPPS-Ⅱ期的时候与ALPPS-Ⅰ期开腹和关腹的两个时间点,均有显著差异,证明其肝脏的再生明显。其余种类的细胞的变化结果无显著差异(P>0.05)。进一步根据病人ALPPS-Ⅰ期术后肝脏增生的情况,分成高低KGR组进行比较,高KGR代表的是快速增生的肝脏。其中ALPPS-Ⅰ期关腹的高低KGR两组病人之间进行比较,高KGR组的病人,窦内皮细胞和库普弗细胞的阳性表达率较高,差异具有显著性(窦内皮细胞:P=0.01,库普弗细胞:P=0.028),说明两种细胞与肝脏再生快慢有着密切的关系。此外,在ALPPS-Ⅱ期的时候,高KGR组的CD133+的肝干细胞显著高于低KGR组(P=0.011),其余指标在高低KGR组之间无显著差异(P>0.05)。<br> 结论:ALPPS肝脏再生是以肝细胞增殖为主的其他各种细胞共同参与的过程,其中ALPPS早期促进肝再生机制可能与肝脏的肝窦内皮细胞细胞和库普弗细胞有着密切的关系。CD133阳性细胞表达率可能与肝脏的再生有关,高表达率有更好的再生能力。
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