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摘要CHAF1b是染色质组装因子1(CAF-1)复合物的p60亚基，在复制叉负责招募组蛋白H3/H4完成DNA复制耦联的核小体组装。前期研究表明CHAF1b参与多种生物学进程，包括DNA复制、核小体组装、DNA损伤修复、细胞周期、细胞增殖和细胞分化等。本试验通过RNAi技术研究CHAF1b基因在小鼠早期胚胎发育过程中的作用，研究结果如下：<br>　　1）通过定量及免疫荧光染色试验，确定了CHAF1b在小鼠卵母细胞及着床前胚胎发育过程中的表达模式。结果显示：CHAF1b的mRNA表达从2-细胞阶段开始增加，在桑葚胚阶段达到最高，然后急剧下降；CHAF1b蛋白定位在细胞核，在生发泡（GV）、减数第二次分裂中期（MII）和合子期中不表达，从2-细胞期到囊胚表达量逐渐增加。表明CHAF1b是小鼠胚胎早期合子基因，主要在2-细胞至囊胚阶段的胚胎中表达。<br>　　2）通过RNAi显微注射试验，研究敲降CHAF1b对小鼠植入前胚胎发育的影响，结果显示：敲低CHAF1b并不影响囊胚发育率，但导致孵出率下降（p＜0.01），体外附植生长失败（p＜0.01）。同时发现敲降CHAF1b导致囊胚质量下降，包括囊胚细胞总数、内细胞团（ICM）和滋养外胚层（TE）细胞数目减少；囊胚细胞凋亡和DNA损伤增加。<br>　　3）研究发现敲降CHAF1b引起胚胎第一次谱系分化的关键调控因子（包括Oct4，Cdx2，Sox2和Nanog）的表达下调。进一步的分析表明，敲降CHAF1b导致组蛋白H3.1/3.2丰度增加和组蛋白H3.3丰度减少，同时发现抑制性组蛋白标记（H3K9me2/3和H3K27me2/3）丰度减少和激活性组蛋白标记（H3K4me2/3）丰度增加。<br>　　4）RNA-seq分析显示敲降CHAF1b导致1508个基因的差异表达，包括表观遗传修饰，谱系分化和凋亡相关的基因。ATAC-seq测序分析的结果表明，沉默CHAF1b会导致谱系分化基因和凋亡相关基因的染色质可及性改变。<br>　　综上所述，本论文研究了CHAF1b在早期胚胎发育中的功能。证明CHAF1b在小鼠植入前的胚胎中发挥着重要作用。