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核桃内种皮抗氧化成分的提取分离及其活性研究

摘要核桃(JuglansregiaL.)是我国重要的经济树种,分布广泛,坚果年产量在400万吨左右,但核桃内种皮、分心木、青皮、花粉等副产物利用率低。前人研究显示,核桃内种皮含有大量多酚、黄酮等抗氧化活性物质,具有开发成天然抗氧化剂的潜力。本文以核桃内种皮等副产品为供试材料,对其提取物的体外抗氧化活性、化学成分组成及多酚类化合物鞣花酸的降脂和降血糖活性进行研究,主要结果如下:<br>  (1)在供试7种不同组织部位的核桃材料(叶片、花粉、青皮、分心木、内种皮、带皮种仁、去皮种仁)中,核桃内种皮总酚及总黄酮含量最高,分别为536.80mgGAE/gAE、282.18mgRE/gAE,且DPPH、ABTS自由基清除能力及FRAP还原能力最强。内种皮醇提物的不同极性萃取物中,乙酸乙酯萃取物(EAE)总酚含量最高,为565.47mgGAE/gEAE,且DPPH、ABTS自由基清除能力及FRAP还原能力最强,其DPPH自由基清除能力(IC50=1.361μg/mL)为阳性对照VC(IC50=4.704μg/mL)的3.46倍。<br>  (2)油脂氧化稳定性研究结果显示,乙酸乙酯萃取物(EAE)对油脂氧化的抑制作用强于其他极性萃取物,添加0.02%EAE能使核桃油的货架期从68.8d延长到84.8d,使猪油的货架期从270.4d延长到352.0d。<br>  (3)利用HPLC-ESI-MS-MS技术在EAE中共鉴定出46种抗氧化活性物质,包括20种黄酮类和26种多酚类物质。两类物质含量最高的分别为柚皮素和鞣花酸。EAE中游离鞣花酸为68.29mg/gEAE,对其酸水解条件进行优化,得出最佳工艺为:三氟乙酸浓度3.5mol/L,温度95℃,时间3.5h,此工艺条件下总鞣花酸含量为573.01mg/gEAE。<br>  (4)内种皮鞣花酸经碱溶酸沉处理,其纯度由44.91%提高到93.58%。对纯化后鞣花酸进行体外降脂活性研究,结果表明,供试浓度5mg/mL时,其结合胆酸盐的能力为辛伐他丁降脂药的81.19%,pH7条件下吸附胆固醇能力为辛伐他丁的85.41%;体外降血糖研究结果表明,纯化后鞣花酸抑制α-葡萄糖苷酶活性能力IC50为5.954μg/mL,是降糖药阿卡波糖(IC50=1.933μg/mL)的32.47%,抑制α-淀粉酶活性能力IC50为88.688μg/mL,为阿卡波糖(IC50=9.151μg/mL)的10.32%。<br>  综上认为,核桃内种皮乙酸乙酯萃取物有很强的自由基清除活性及抗油脂氧化活性,其酚类主要化合物鞣花酸有较强的降脂和降血糖活性,这为核桃内种皮作为新型植物源抗氧化剂开发以及带皮核桃仁作为保健食品辅助降脂和降血糖奠定了坚实的理论基础。

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