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摘要盐胁迫作为一种常见的非生物胁迫，对植物生长发育有着重要的影响。已有研究表明，当拟南芥遭受盐胁迫时，会抑制赤霉素信号途径中一类关键蛋白—DELLA蛋白，导致拟南芥晚花。但是，关于盐胁迫如何调控DELLA蛋白的稳定性，至今尚未报道。甲基乙二醛（MG）是糖酵解过程中固有副产物，作为一种重要的信号分子，越来越多的研究表明，在植物应答外界胁迫的过程中起着关键的调控作用。但是，MG调控的生化和分子机理并不清楚。<br>　　MG作为一种反应活性较高的三碳分子能够修饰蛋白质。因此，本实验室制备了识别MG修饰蛋白质的单克隆抗体，筛选拟南芥MG修饰蛋白，发现其中之一是DELLA蛋白。本研究通过分子，生理生化，遗传等实验方法，发现盐胁迫促进MG含量升高，从而修饰并稳定RGA蛋白（DELLA蛋白之一），导致拟南芥晚花。本论文获得的研究结果如下：<br>　　1.盐胁迫促进拟南芥体内MG含量积累导致晚花<br>　　我们用NaCl和MG外源处理拟南芥野生型，发现盐胁迫和MG处理都能提高拟南芥体内MG含量并导致晚花。植物体内MG主要通过乙二醛酶（GLY，Glyoxalase）系统降解，因此，我们获得了转基因株系35S::GLYI235S::GLYII4。在盐胁迫和MG处理下，同野生型相比，35S::GLYI235S::GLYII4中MG含量低，开花早。这些结果表明MG参与了盐胁迫对拟南芥开花的延迟。<br>　　2.MG通过稳定RGA蛋白延迟拟南芥开花<br>　　利用RGA::RGA-GFP株系，通过荧光观察和Westernblot实验，发现MG能够稳定RGA蛋白。我们还发现，盐胁迫和MG处理并不改变DELLA蛋白五突变体（della）的早花表型。这些结果表明，MG应是通过稳定DELLA蛋白影响开花。<br>　　3.MG通过抑制RGA蛋白的泛素化提高RGA蛋白的稳定性<br>　　我们纯化了在大肠杆菌表达的RGA蛋白和E3连接酶—SLY1,进行泛素化实验，结果表明MG预处理使得RGA的泛素化受到明显抑制。<br>　　4.MG在体内体外修饰RGA蛋白<br>　　分析MG处理纯化的RGA蛋白，利用能够识别被MG修饰蛋白质的抗体—Anti-MMP，结果表明RGA蛋白的修饰程度随着MG浓度的升高而增加。我们还构建获得RGA过表达株系（pER8::RGA-Myc-His-Flag和35S::RGA-Myc-His-Flag）并进行pulldown实验，实验结果进一步证明拟南芥体内RGA蛋白也被MG修饰。<br>　　5.质谱检测MG的修饰位点<br>　　由于MG修饰蛋白质的氨基酸是精氨酸和赖氨酸。将外源修饰的RGA蛋白和pulldown得到体内RGA蛋白进行质谱分析，得到了MG对RGA的修饰位点。这为我们下一步深入研究MG如何调控RGA蛋白稳定性，以及RGA与CO蛋白的互作提供了支撑。