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摘要环状RNA（Circular RNA，circRNA）是一种两端闭合的环形非编码RNA分子，少数可编码蛋白质，是一类具有重要生物学功能的调控型 RNA，其在病毒感染过程中也发挥重要功能。甲型流感病毒（Influenza A Virus，IAV）属于正黏病毒科单股负链RNA病毒，是具有高度传染性的人畜共患病病原体。IAV能够在鸟类和哺乳动物等多种动物中持续传播，对人类、家畜和野生动物的健康构成严重威胁。但目前对circRNA在流感病毒方面的研究还相对较少。本研究旨在探究甲型流感病毒感染对 A549 细胞内 circRNA 表达模式的影响，并就hsa_circ_0070421在IAV感染中的功能进行了初步研究。<br>　　首先，应用基因芯片技术获得了IAV感染前后A549细胞circRNA表达谱。筛选出差异显著表达的circRNA，预测差异Top10的circRNA的miRNA的靶基因，并对靶基因进行GO（Gene Ontology）富集分析和KEGG通路分析。结果显示IAV感染A549细胞前后，共有373个circRNA表达差异显著，即207个表达上调和166表达下调。GO分析表明，差异circRNA的潜在生物学功能主要分布在转录调控、细胞代谢的正向调控、RNA 聚合酶Ⅱ转录因子活性、细胞间信号传递、神经系统发育等；KEGG通路分析显示，表达差异circRNA潜在相关信号通路主要分布在信号传递相关、癌症、趋化因子、细胞增殖和凋亡、MAPK等相关信号通路。通过对随机选出5个差异表达显著circRNA进行了qPCR验证，结果与芯片数据一致。<br>　　其次，为了探究表达显著上调circRNA之一的hsa_circ_0070421 与IAV感染的关系，我们进行了以下实验：① hsa_circ_0070421的成环情况进行鉴定。② 检测了IAV感染不同条件下A549细胞内hsa_circ_0070421的表达情况，结果显示 hsa_circ_0070421 与病毒感染时间和感染剂量呈显著正相关，说明hsa_circ_0070421的表达与IAV感染关系密切。③ 在选取的5种不同器官和组织来源细胞系内均可检测到hsa_circ_0070421的表达，表明hsa_circ_0070421是一个广泛存在的circRNA。④在Polyinosinic:polycytidylic acid（polyI：C）、细菌脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）、顺铂（cisplatin）和血清饥饿处理后的A549细胞中分别检测hsa_circ_0070421的表达水平，结果表明hsa_circ_0070421的表达增加与poly I:C的刺激明显相关，而与LPS、cisplatin以及血清饥饿处理关系不大，说明hsa_circ_0070421表达上调是宿主细胞应答IAV复制的结果。⑤ 使用不同信号通路抑制剂的实验证实 hsa_circ_0070421 的表达是 IAV 感染所致JAK-STAT信号通路激活的产物。<br>　　最后，为了明确hsa_circ_0070421在IAV感染中所扮演的角色，在A549细胞中对 hsa_circ_0070421 进行过表达和敲低并检测后续指标变化，结果表明hsa_circ_0070421过表达抑制了病毒复制，并且促进了IAV感染诱导的干扰素刺激应答元件（Interferon Stimulated Response Element，ISRE）荧光素酶报告基因活性和Ifnb1 mRNA的表达；反之，hsa_circ_0070421的敲低促进了IAV复制并抑制了病毒感染诱导的 ISRE 活性以及 Ifnb1 mRNA 的表达，说明hsa_circ_0070421可以正调控I型干扰素相关的抗病毒天然免疫应答，并抑制IAV的复制。<br>　　综上所述，本研究揭示了 circRNA 的表达与 IAV 感染的联系，证实了hsa_circ_0070421是一个具有正调控I型干扰素天然免疫应答功能的宿主抗IAV因子。