摘要志贺毒素大肠杆菌O103菌株可引起食源性疾病的发生。由于抗生素滥用导致耐药菌的出现,噬菌体被认为是抗生素的替代品。本研究以大肠杆菌O103为宿主菌,从污水处理厂废水中分离得到噬菌体PO103-1和PO103-2,对这两株噬菌体进行了生物学特性的研究以及基因组学的分析,并评估了其在鸡皮和牛奶中对大肠杆菌O103的削减能力。主要研究结果如下:<br> (1)从废水中分离得到噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2,噬菌体纯化后噬菌体的形状为圆形,大小统一且边缘清晰,直径大小为3~4mm。<br> (2)测定噬菌体的生物学特性,主要包括一步生长曲线、宿主谱、热稳定性、pH稳定性、氯仿敏感性、乙醇敏感性、紫外线敏感性及透射电镜形态观察。噬菌体PO103-1和PO103-2的潜伏期都为10min,噬菌体PO103-1和PO103-2的爆发期分别为50min和60min;噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2具有很强的宿主特异性,其可互相裂解大肠杆菌O103-1和大肠杆菌O103-2,但不能够裂解沙门氏菌等其它种类的细菌;噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2在40~60℃较稳定,具有较高的温度耐受性;噬菌体PO103-1对pH的耐受性为4~11,噬菌体PO103-2对pH的耐受性为4~10,两株噬菌体具有良好的pH耐受性;噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2对氯仿不敏感,其没有囊膜;噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2对乙醇非常敏感,在乙醇浓度高于50%后便可完全失活;PO103-1和噬菌体PO103-2对紫外线比较敏感,紫外灯照射150min后两株噬菌体完全失活;噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2在电镜下形态呈蝌蚪状,具有正多面体的头部和无收缩性的尾部。<br> (3)噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2全基因组测序和分析。噬菌体PO103-1基因组包含39325bp的双链DNA,GC含量为52.8%。噬菌体PO103-2基因组包含53040bp的双链DNA,GC含量为43.9%。<br> (4)评估噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2在鸡皮和牛奶中对大肠杆菌O103的防治效果。在鸡皮中,噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2可以使大肠杆菌O103分别下降0.92~1.32lgCFU/mL和0.58~0.65lgCFU/mL。在牛奶中,结果发现在3~9h的时间段内,大肠杆菌O103一直处于检测线以下。噬菌体PO103-1和噬菌体PO103-2在鸡皮和牛奶的防治效果研究中,均表现出较好的抗菌效果。
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