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Rab27蛋白介导外泌体分泌对三阴性乳腺癌p21转位的影响

摘要目的:分析Rab27蛋白在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达水平,探讨Rab27介导外泌体分泌对TNBC中EGFR/PI3K/Akt/mTOR信号通路下游因子p21转位的影响。方法:Westernbolt检测不同分型乳腺癌中Rab27蛋白的表达水平,构建低表达Rab27细胞株,并提取实验组、对照组巨噬细胞培养上层澄清液体,添加于MDA-MB-231细胞株培养基中进行干预,对Rab27低表达组细胞的迁徙、侵袭能力用迁徙、细胞侵袭实验检测,并对组细胞内p21、p-p21的表达水平利用荧光定量实验及Western-Blot实验进行检测。结果:1)相比于正常乳腺组织及其他分型的乳腺癌组织,Rab27在TNBC癌组织中表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);2)与空白对照组、空载组相比,Rab27低表达组中细胞的迁徙、侵袭力明显下调,有统计学差异(P<0.01);3)与MDA-MB-231细胞组、MDA-MB-231细胞+TAM上清液组、MDA-MB-231细胞+阴性对照-TAM上清液组相比,MDA-MB-231细胞+Rab27-shRNA-TAM上清液组中p-p21表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1)TNBC中Rab27蛋白表达水平较高;2)Rab27蛋白低表达可使癌细胞迁徙、侵袭能力下降;3)TNBC中Rab27蛋白表达水平降低可抑制EGFR/PI3K/AKT/mTOR信号通路的传导,导致下游因子p21的异常磷酸化及亚细胞定位改变减少,Rab27、p21可能成为预测乳腺癌预后的重要指标。

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