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摘要时间分辨荧光免疫分析技术是依赖于稀土元素独特的荧光性质而发展起来的一种新型免疫检测技术，它集合了放射免疫技术、酶联免疫技术以及普通荧光免疫技术的优点，具有较高的灵敏度、较强的特异性、稳定性好，并且标记物荧光寿命长、检测的线性范围宽、易操作以及非放射性，在免疫分析领域展现了良好的应用前景。<br>　　本文采用水热合成法制备了结晶度高、单分散性好、荧光寿命长的稀土掺杂纳米晶体LaF3:Eu3+，通过聚丙烯酸（polyacrylic acid,PAA）对其表面进行功能化修饰，并分别以钆离子（Gd3+）和增敏剂A（ZMA）作为发光中心铕离子（Eu3+）的敏化剂，提高了LaF3:Eu3+纳米晶体的发光效率。同时，本研究还建立了基于稀土荧光微球的时间分辨荧光免疫分析技术用于血清样本中新冠中和抗体的检测，并取得了较好的检测效果。<br>　　本文主要研究内容和结论如下：<br>　　（1）采用水热法制备了不同铕离子（Eu3+）掺杂度的LaF3:Eu3+纳米晶体，其晶型结构、形貌特征、尺寸大小基本保持一致，均呈现出较规则的类六边形结构，粒径为50nm左右。研究结果显示，LaF3:Eu3+纳米晶体的荧光光谱对应于发光中心Eu3+离子的特征激发和发射，并且其荧光寿命高达3～4毫秒。此外，成功对LaF3:Eu3+纳米晶体进行了PAA功能化修饰，为其后续应用研究奠定了基础。<br>　　（2）以无机离子钆离子（Gd3+）作为敏化剂，与激活剂铕离子（Eu3+）共掺杂于氟化镧（LaF3）基质中，系统地研究Gd3+离子掺杂度对纳米晶体的结构及荧光性能的影响，发现Gd3+离子的掺杂延长了纳米晶体的荧光寿命，从4.07毫秒（LaF3:0%Gd3+,Eu3+）延长至5.92毫秒（LaF3:40%Gd3+,Eu3+），但是Gd3+离子的敏化效果不佳，甚至在一定程度上降低了纳米晶体的稳定性。以有机配体ZMA作为敏化剂，FZB作为非水辅助配体，利用ZMA与铕离子（Eu3+）之间的共振能量转移以及FZB通过取代荧光淬灭基团-OH，与Eu3+离子发生强配位作用，使纳米晶体的荧光得到有效增强，但是ZMA和FZB的结合影响了纳米晶体的荧光寿命。<br>　　（3）建立了新冠中和抗体的时间分辨荧光免疫层析方法，基于稀土荧光微球的阻断法和竞争法两种检测模式的IC50分别为0.82μg/mL和4.13μg/mL；对血清样本的免疫检测条件进行优化研究，得到最佳检测条件为：血清稀释比为1:25，pH为7.0，BSA含量为2%，吐温-20含量为0.6%。