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摘要在内吞循环运输过程中，Rab5/RAB-5是调控物质从早期内体到循环内体的分子开关。然而，Rab5/RAB-5在此过程中的具体调控机制仍有很多的未知。本文鉴定出秀丽隐杆线虫肠上皮细胞中的一个新型循环调控因子—LET-502/ROCK。LET-502缺失导致分选内体上RAB-5驻留减少。值得注意的是，LET-502与失活态RAB-5(GDP)有很强的相互作用，且LET-502能够增强RABX-5与RAB-5(GDP)之间的结合水平，并可促进RABX-5对RAB-5的GEF活性，该促进作用可能与LET-502改变RABX-5的自抑制构象有关。我们随后发现，作为CED-10的两个功能冲突的效应因子,同时缺失LET-502和TBC-2/RAB-5-GAP可导致RAB-5在内体上聚积，且LET-502的功能位置位于TBC-2的下游，这提示在CED-10的总调控下，TBC-2可介导RAB-5的失活，然后通过LET-502再激活RAB-5。我们进一步比较LET-502和RME-6/RAB-5-GEF的功能位置，发现缺失LET-502-RABX-5模块或RME-6导致分选内体不同空间亚群上的RAB-5减少。<br>　　目的：研究LET-502/ROCK在秀丽隐杆线虫肠上皮细胞循环运输中的作用及机制。<br>　　方法：运用生物化学、细胞生物学及遗传学等实验技术以开展本课题研究。<br>　　结果：在秀丽隐杆线虫的肠上皮细胞中，我们发现缺失LET-502可导致基底外侧循环运输受阻，过表达包含LET-502C-末端PH-like结构域的截短蛋白可以很好的挽救这一受阻表型；LET-502主要定位于肠上皮细胞的分选内体，并可促进RAB-5上膜；LET-502与RABX-5/RAB-5-GEF有相互作用，亦有助于后者在分选内体上的定位；随后我们发现，LET-502可以促进RABX-5和RAB-5(GDP)的相互作用，并通过打开RABX-5的自抑制构象以释放其对RAB-5的GEF活性；进一步研究表明，LET-502作为CED-10的效应因子，协同CED-10的另一效应因子TBC-2/RAB-5-GAP，参与调控循环运输中分选内体上RAB-5的活性动态，且LET-502在功能位置上处于TBC-2的下游。我们的结果还发现，缺失LET-502或RME-6可减少分选内体不同空间亚群上RAB-5的驻留。<br>　　结论：在秀丽隐杆线虫肠上皮细胞中，RAB-5存在于功能上可能耦合的不同分选内体亚群之中。在CED-10的调控下，LET-502协同RABX-5重新激活位于深部胞浆内体亚群上的RAB-5，从而确保基底外侧循环运输的正常进行。