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摘要目的：<br>　　肥胖是多种代谢性疾病发生发展的重要危险因素，主要通过脂肪细胞肥大和脂肪细胞形成两种方式发生。促进皮下脂肪细胞募集和脂肪细胞形成，而非细胞体积增大对肥胖及其相关代谢并发症起到重要的保护作用。脂肪细胞形成受到线粒体及其相关分子的精密调节，核编码蛋白NADH脱氢酶（泛醌）Fe-S蛋白4（Ndufs4）是线粒体复合物I的辅助亚基，参与小鼠胚胎干细胞分化功能调节，但是在脂肪细胞形成中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨Ndufs4在白色脂肪细胞形成中的作用及相关机制。<br>　　方法：<br>　　在db/db小鼠模型中，通过Hamp;E染色观察小鼠脂肪组织形态改变，蛋白质免疫印迹（WB）及实时荧光定量PCR（RT-qPCR）分别检测皮下及内脏脂肪组织分化关键因子(PPARγ、C/EBPα、FABP4、Adiponectin)蛋白及mRNA表达水平；通过免疫组织化学染色方法观察Ndufs4在脂肪组织表达，并通过WB和RT-qPCR方法进行定量。siRNA转染3T3-L1前体脂肪细胞构建Ndufs4敲减模型，慢病毒感染3T3-L1前体脂肪细胞构建Ndufs4稳定过表达模型；通过油红O染色及定量检测细胞内脂质蓄积情况；WB和RT-qPCR方法分别检测脂肪细胞分化关键因子蛋白及mRNA表达水平；CCK8检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡水平；流式细胞术和荧光显微镜检测活性氧（ROS）水平。N-乙酰L-半胱氨酸（NAC）处理Ndufs4敲减3T3-L1前体脂肪细胞，检测脂滴形成及脂肪细胞分化关键基因的表达。<br>　　结果：<br>　　1）动物实验结果表明，与野生型小鼠相比，db/db小鼠皮下及内脏脂肪组织细胞体积增大，脂肪细胞分化关键因子（PPARγ、C/EBPα、FABP4、Adiponectin）蛋白及mRNA表达水平降低。<br>　　2）与野生型小鼠相比，db/db小鼠皮下及内脏脂肪组织Ndufs4表达水平下降；与分化前相比，3T3-L1前体脂肪细胞分化后Ndufs4表达水平上调。<br>　　3）3T3-L1前体脂肪细胞过表达Ndufs4后，脂滴聚集明显增加，脂肪细胞分化相关基因mRNA水平显著上调且具有统计学差异。<br>　　4）3T3-L1前体脂肪细胞敲减Ndufs4后，脂滴蓄积明显下降，脂肪细胞分化相关指标显著下调；然而，细胞凋亡和增殖能力并无明显改变。<br>　　5）3T3-L1前体脂肪细胞敲减Ndufs4后，荧光显微镜及流式细胞术检测发现ROS水平明显上升；加入ROS抑制剂NAC后，脂滴蓄积明显增加，WB及RT-qPCR检测发现脂肪细胞分化相关指标蛋白及mRNA水平显著上调。<br>　　结论：<br>　　Ndufs4通过介导ROS产生水平正向调控3T3-L1前体脂肪细胞成脂分化。