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摘要目的：通过建立小鼠颈动脉结扎模型，检测阿帕替尼（Apatinib）对在体颈动脉内膜损伤所致的内膜增生的影响。检测Apatinib对体外PDGF-BB诱导的大鼠原代VSMC增殖、迁移和去分化的影响。通过体外PDGF-BB诱导大鼠原代VSMC和大鼠血管平滑肌细胞系A7r5，阐明Apatinib在血管重构中的作用机制。<br>　　方法：将C57BL/6J小鼠（野生型，8周，25-30g，雄性）随机分为3组，每组各6只；分别为：假手术+溶剂对照组、损伤+溶剂对照组及损伤+Apatinib组。于造模前一天开始向小鼠腹腔注射Apatinib（10mg/kg）或等体积玉米油（溶剂对照），持续给药2周。2周后取小鼠颈动脉,行HE染色和马松（Masson）染色并测量血管内膜（Intimal）厚度，中膜（Media）厚度，计算内膜中膜厚度比值（Intima-to-media ratio），以评估Apatinib对新生内膜的影响。选取250g左右的雄性SD大鼠，采用酶消法分离提取大鼠原代VSMC，第3-7代用于实验，培养至细胞融合度约80%时，改用无血清的培养基饥饿24小时。给予溶剂对照或不同浓度的Apatinib（50nM，100nM，200nM）预处理VSMC4小时，再用PDGF-BB（30ng/mL）在无血清的培养基中刺激24小时。EdU（5-Ethynyl-2''-deoxyuridine）试验检测VSMC增殖表型；Transwell小室细胞迁移试验和细胞划痕试验检测VSMC迁移表型；免疫荧光分析VSMC收缩表型；Westernblot检测细胞膜表面及细胞增殖、迁移、凋亡、去分化等过程中关键基因的蛋白水平变化。大鼠VSMC细胞系A7r5饥饿24小时后，用溶剂对照或Apatinib（200nM）预处理1小时，再给予PDGF-BB（30mg/mL）刺激不同时间（0min，5min，15min，30min，45min），Western blot检测细胞膜表面及细胞增殖、迁移、内膜新生过程中重要通路信号分子的磷酸化和总蛋白表达水平。<br>　　结果：小鼠颈动脉结扎2周后获取小鼠颈动脉，HE染色表明，与假手术+溶剂对照组相比，损伤+溶剂对照组新生内膜明显；Masson染色示中膜弹力纤维层无明显增厚。与损伤+溶剂对照组相比，注射Apatinib2周可减轻内膜增生。EdU试验表明，Apatinib呈剂量依赖性降低PDGF-BB诱导的增殖VSMC细胞数量；Westernblot证实，Apatinib对凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax，Caspase3及Caspase3-cleaved的表达无明显影响。Apatinib呈剂量依赖性下调PCNA，CyclinD1的表达，上调抑癌基因P27的表达，对抑癌基因P21无明显效应。Transwell小室细胞迁移试验和细胞划痕试验表明，Apatinib呈剂量依赖性抑制PDGF-BB诱导的VSMC迁移；Westernblot证实，Apatinib下调细胞迁移相关蛋白MMP2及MMP9的表达。Western blot证实，Apatinib呈剂量依赖性上调SMα-actin和SM22α的表达；免疫荧光显示，相同曝光时间下，Apatinib可以恢复PDGF-BB诱导的VSMC中SMα-actin的荧光强度；Apatinib可以恢复损伤血管壁VSMC中SMα-actin的荧光强度。Western blot结果表明，Apatinib呈剂量依赖性下调p-PDGFR-β及p-PLC-γ1的表达水平，对其总蛋白水平无影响。在细胞系A7r5中，PDGF-BB刺激5分钟后p-PDGFR-β，p-PLC-γ1，p-Erk1/2和p-JNK明显上调并达峰，Apatinib在所观察时间点抑制p-PDGFR-β，p-PLC-γ1，p-Erk1/2和p-JNK的表达，对其总蛋白表达无明显影响。<br>　　结论：Apatinib可以减轻小鼠颈动脉结扎损伤所致的内膜增生。Apatinib抑制PDGF-BB诱导的大鼠VSMC增殖和迁移。Apatinib在体外和体内均有抑制VSMC去分化的作用。PDGFR-β，PLC-γ1，ERK1/2和JNK信号分子参与了Apatinib对PDGF-BB介导的VSMC表型的调控。