摘要目的:<br> 观察金钗石斛水煎剂灌胃后衰老大鼠术后学习、记忆、运动能力的变化,探讨其神经系统炎症反应相关的保护作用及可能机制,为临床应用金钗石斛预防和改善术后认知功能障碍提供理论支持。<br> 方法:<br> 4月龄雄性SPF级SD大鼠,连续42d于大鼠颈背部皮下注射10%D-半乳糖0.125g/kg/d,构建衰老大鼠模型。将衰老大鼠(N=60)进行随机分组,共分为3个大组,每组各20只(n=20)。分别为:①空白对照组(CON组);②POCD模型组(P组);③金钗石斛水煎剂治疗组(D组)。CON组不作POCD建模处理,P组与D组在七氟烷麻醉下行单侧肾切除术。依据手术后连续灌胃时间不同,每组再分为连续灌胃7d和14d两个亚组,每个亚组各10只(n=10),分别为CON7组及CON14组、P7组及P14组、D7组及D14组。于手术麻醉苏醒2h后进行灌胃,D组按10g/kg/d金钗石斛水煎剂灌胃,P组与CON组予以相同体积生理盐水灌胃。各组大鼠在术前采用Morris水迷宫定位航行实验评价各组大鼠学习基线水平是否一致,术后行空间探索实验、工作记忆实验和平衡木实验,检测各组大鼠学习记忆能力以及平衡能力和运动协调能力;在行为学实验完成后,采用戊巴比妥钠麻醉大鼠,随后进行大鼠血液及脑组织取材,采用HE染色观察大鼠海马神经元细胞的形态变化,Elisa法检测血清中NSE、S-100β及炎症因子含量,Western blot法检测大鼠海马内NF-κB、IκBα蛋白含量表达。<br> 结果:<br> 1.Morris水迷宫实验:<br> ①术前各组大鼠定位航行实验:各组大鼠定位航行实验逃避潜伏期所需时间,均呈逐渐减少趋势。与第一天及第二天相比,第三天至第五天各组大鼠逃避潜伏期所用时间明显缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);第三天至第五天各组大鼠组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。<br> ②术后7d及14d空间探索实验:P组较CON组第三象限滞留时间、有效平台进入次数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);D组较P组第三象限滞留时间、有效平台进入次数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。<br> ③术后7d及14d工作记忆实验:P组逃避潜伏期较CON组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);D组逃避潜伏期较P组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。<br> 2.术后7d及14d平衡木实验:<br> P组大鼠平衡木实验始动时间及过杆时间均较CON组明显延长,差异有统计学意义(P<0.05);D组大鼠始动时间及过杆时间较P组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。<br> 3.海马HE染色:<br> CON组海马CA1区神经元细胞排列紧密、整齐,细胞形态规则,细胞核清晰可见,胞质清楚。P组可见海马神经元细胞排列松散,细胞形态不规则,细胞核固缩,染色较深。D组见部分细胞排列紊乱,少量细胞核固缩,染色较P组均匀。<br> 4.Elisa法检测血清NSE、S-100β及炎症因子含量:<br> P组血清NSE、S-100β及炎症因子含量较CON组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);D组较P组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。<br> 5.Western blot法检测海马NF-κB、IκBα蛋白表达:<br> P组较CON组NF-κB蛋白含量上调,IκBα蛋白含量下调,差异具有统计学意义(P<0.05);D组较P组NF-κB蛋白含量下调,IκBα蛋白含量上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。<br> 结论:<br> 金钗石斛水煎剂连续灌胃后可改善衰老大鼠术后认知功能的损害,其保护作用可能与通过抑制NF-κB信号因子,降低神经炎症反应程度有关。
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