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摘要目的：本研究拟通过对耐药性癫痫的血清外泌体进行蛋白组学研究，寻找耐药性癫痫潜在的生物标记物，并在耐药性癫痫组差异性表达的蛋白选择ITGAX进行动物实验，探讨其参与癫痫发作的可能机制。<br>　　方法：1.纳入耐药性癫痫患者、临床治疗效果好的癫痫患者以及年龄性别相匹配的健康对照者各10例，对各组血清外泌体进行蛋白组学研究，并使用生物信息学进行GO和KEGG分析。2.通过生物信息学富集分析,选择ITGAX在动物实验中研究癫痫发生的可能机制，采用免疫印迹检测ITGAX在正常组和癫痫组的血清外泌体和海马中的表达情况。3.使用尾静脉注射ITGAX腺相关敲减病毒干预癫痫模型，并分为正常对照组（Control）、匹罗卡品组（癫痫组）（Pilo）、匹罗卡品+ITGAX敲低组（Pilo+ITGAX-）、匹罗卡品+空病毒组（Pilo+Vehicle），免疫印迹检测各组海马中ITGAX的变化情况，行为学评估各组小鼠癫痫发作潜伏期情况，并检测各组血脑屏障变化情况：免疫印迹检测海马中白蛋白表达、ELISA检测血清中S100β的水平。4.使用腹腔注射外泌体抑制剂干预癫痫模型，并分为正常对照组（Control）、匹罗卡品组（Pilo）、匹罗卡品+GW4869外泌体抑制剂组（Pilo+GW4869）、匹罗卡品+溶剂对照组（Pilo+DMSO）。免疫印迹检测各组海马中ITGAX的变化情况，行为学评估各组小鼠癫痫发作潜伏期情况，并检测各组血脑屏障变化情况：免疫印迹检测海马中白蛋白表达、ELISA检测血清中S100β的水平。<br>　　结果：1.蛋白组学分析发现：与健康对照组相比，在耐药性癫痫组中有66种蛋白质显著上调，有63种蛋白组显著下调；与临床治疗效果良好的癫痫患者组相比，在耐药性癫痫组中，有289种蛋白显著上调，有301种蛋白显著下调。维恩图分析发现对比正常组和临床治疗效果好的癫痫组，在耐药性癫痫组中发现了43种显著变化的蛋白。生物信息学表明这43种蛋白主要富集于免疫反应、细胞粘附分子结合以及氨基酸代谢等方面，且免疫反应占主导地位。差异性蛋白ITGAX是免疫反应及细胞粘附方面中变化最为显著的蛋白。<br>　　2.ITGAX在正常和癫痫模型血清外泌体中的表达情况：与正常组相比，癫痫组的血清外泌体中ITGAX的蛋白水平上调，Plt;0.05。<br>　　3.ITGAX在正常和癫痫模型海马组织中的表达情况：与正常组相比，癫痫组的海马组织中ITGAX的蛋白水平上调，Plt;0.05。<br>　　4.使用尾静脉注射ITGAX腺相关敲减病毒干预后，与匹罗卡品+空病毒组（Pilo+Vehicle）相比，匹罗卡品+ITGAX敲低组（Pilo+ITGAX-）海马中的ITGAX表达下调，癫痫发作的潜伏期明显延长，海马中白蛋白表达降低，血清中S100β的水平降低，Plt;0.05。<br>　　5.使用腹腔注射外泌体抑制剂干预后，与匹罗卡品+溶剂对照组（Pilo+DMSO）相比，匹罗卡品+GW4869外泌体抑制剂组（Pilo+GW4869）海马中的ITGAX表达下调，癫痫发作的潜伏期明显延长，海马中白蛋白表达降低，血清中S100β的水平降低，Plt;0.05。<br>　　结论：1.与健康对照组和临床治疗效果良好的癫痫患者相比，耐药性癫痫血清外泌体的差异性蛋白主要富集于免疫反应、细胞粘附分子结合以及氨基酸代谢等方面。<br>　　2.ITGAX通过外泌体介导，从外周血清进入中枢神经系统在海马中高表达，其参与癫痫发作机制可能与血脑屏障通透性改变相关。