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摘要目的：鼻咽癌是一种来源于人鼻咽上皮的实体肿瘤，咽隐窝是鼻咽癌的好发部位。TRPV4是一种非选择性阳离子通道，多项研究可知TRPV4在多种肿瘤中的异常表达，并参与调节肿瘤细胞增殖、转移及上皮间质转化等过程。本课题将试图探究鼻咽癌中TRPV4中的表达状况，初步研究TRPV4在体外水平对鼻咽癌细胞的增殖、迁移等生物学行为的影响，为鼻咽癌临床治疗提供新思路。<br>　　方法：观察鼻咽正常上皮细胞系NP69，以及鼻咽癌细胞系HNE1、C666-1、CNE1和CNE2中TRPV4的表达，再进一步研究TRPV4对鼻咽癌Ca2+调控的功能以及对细胞的增殖、迁移、NFAT1的核表达等行为的影响。①RT-qPCR实验：提取五组细胞系中的总RNA后,再进行RT-PCR反转录实验，利用得到的cDNA,进行qPCR检测，观察TRPV4在鼻咽正常上皮细胞系NP69，以及鼻咽癌细胞系HNE1、C666-1、CNE1和CNE2中的表达情况。②钙成像实验：用TRPV4选择性拮抗剂HC067047(1μM)预处理，然后加入TRPV4选择性激动剂GSK1016790A(100nM)刺激，观察TRPV4调控鼻咽癌细胞Ca2+内流的功能。③CCK-8方法：分为实验组和对照组，实验组中加入TRPV4特异性抑制剂HC0670471μM；对照组中加入0.1%DMSO，利用CCK-8试剂盒，检测两组细胞的增殖能力。④Transwell迁移实验：采用Transwell迁移实验来检验，抑制TRPV4的活性对细胞迁移的影响。⑤Westernblot方法：提取细胞核蛋白，应用Westernblot方法来检验抑制TRPV4活性及清除Ca2+对NFAT1核表达的影响。<br>　　结果：1.RT-qPCR实验结果显示在鼻咽癌细胞中TRPV4高表达。2.钙离子成像实验表明TRPV4为鼻咽癌细胞中功能性钙离子通道蛋白。3.CCK-8实验显示：抑制TRPV4活性显著降低了鼻咽癌细胞的生长。4.Transwell迁移实验显示：抑制TRPV4的活性可降低鼻咽癌细胞的迁移能力。5.Westernblot实验显示：抑制TRPV4的活性或清除Ca2+可降低NFAT1的核表达。<br>　　结论：1.鼻咽癌细胞中高表达TRPV4mRNA。2.抑制TRPV4的活性能够降低鼻咽癌细胞的增殖、迁移。3.在鼻咽癌细胞中的TRPV4为功能性钙离子通道蛋白，能够介导钙离子内流。TRPV4可激活NFAT1的核表达。