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摘要目的：宫颈癌(cervical cancer,CC)是危害女性健康的恶性肿瘤，其发病率和死亡率在世界上仍处于较高的水平。高危型人乳头瘤病毒（HPV）的感染是宫颈癌主要诱因，同时细胞产生的非编码RNA，包括微小RNA（microRNAs,miRNAs）、环状RNA（circular RNA,circRNA）等分子，也可以通过表观调控在宫颈癌的进程中发挥作用。HPV16circE7是由HPV16型病毒编码的circRNA，circE7可通过N6-甲基腺苷（m6A）修饰，定位于细胞质，但其在宫颈癌细胞中的作用机制目前仍不清楚。本课题将主要研究宫颈癌细胞中HPV16病毒编码circE7的表达情况，以及circE7通过miR-214-3p对宫颈癌细胞增殖及凋亡的作用和潜在机制，同时探讨circE7、miR-214-3p与其靶基因GPx4对宫颈癌细胞铁死亡的作用以及调控机制。<br>　　方法：1.培养HPV阴性的C33A细胞以及HPV16阳性的宫颈癌细胞Caski，采用实时荧光定量PCR法检测这两种细胞系中HPV16E7、HPV16circE7以及miR-214-3p的表达水平。<br>　　2.为了探究HPV16circE7及miR-214-3p基因对两种细胞系增殖迁移以及凋亡的影响，在Caski细胞中分别转染针对HPV16circE7的siRNA、miR-214-3p mimics以及mimics NC，在C33A细胞中转染表达HPV16circE7的质粒及pcDNA3.1(+)空载体后，采用CCK8法检测细胞增殖的改变、细胞划痕实验和Transwell迁移侵袭实验检测HPV16circE7及miR-214-3p对细胞迁移以及侵袭的影响，细胞周期以及细胞凋亡由流式细胞仪法进行检测。<br>　　3.使用starBase v3.0miRNA靶基因预测软件预测分析miR-214-3p的靶基因，采用实时荧光定量PCR法以及双荧光素酶报告实验，验证miR-214-3p对靶基因的结合位点及潜在的抑制作用。<br>　　4.在HPV16阳性Caski细胞中，在干预miR-214-3p及其靶基因后，检测GSH、GPx、MDA、ROS、线粒体膜电位水平，以及细胞铁死亡的改变情况；同时在Caski细胞中分别转染针对HPV16circE7的siRNA、miR-214-3p mimics以及mimics NC，在C33A细胞中转染表达HPV16circE7的质粒及pcDNA3.1(+)空载体后采用如上实验检测细胞铁死亡的相关指标及改变情况。<br>　　结果：1.实时荧光定量结果显示：与HPV阴性C33A细胞相比，HPV16阳性Caski细胞中HPV16E7、HPV16circE7呈显著高表达水平（p＜0.01），miR-214-3p呈显著低表达水平（p＜0.01）。<br>　　2.CCK8法、细胞划痕实验、Transwell迁移侵袭实验、细胞周期以及细胞凋亡实验结果显示，在HPV16阳性Caski细胞中敲低HPV16circE7及过表达miR-214-3p后，细胞的增殖、迁移和侵袭水平受到抑制（p＜0.05），细胞周期显示S期显著降低（p＜0.05），细胞的凋亡水平明显上升（p＜0.05），在HPV阴性C33A细胞过表达HPV16circE7后，细胞增殖、迁移和侵袭能力显著上调（p＜0.01），细胞周期显示S期上升（p＜0.05），细胞凋亡水平下降（p＜0.05）。<br>　　3.使用starbase v3.0miRNA靶基因预测软件预测miR-214-3p的靶基因，分析筛选后得到miR-214-3p与GPx4有多个结合位点，采用实时荧光定量PCR法和双荧光素酶报告实验进行验证，在分别转染miR-214-3p mimics和mimics NC后，qPCR结果显示过表达miR-214-3p后GPx4核酸水平减少（p＜0.01），双荧光素酶报告结果显示带有MUT-GPx43’UTR片段的荧光信号显著下降（p＜0.05），证明miR-214-3p与GPx4存在结合位点。<br>　　4.用GPx4的直接抑制剂RSL3抑制GPx4，在Caski细胞中分别转染针对HPV16circE7的siRNA、miR-214-3p mimics以及mimics NC后，采取GSH、GPx、MDA、ROS以及线粒体膜电位实验，结果显示，细胞GSH、GPx表达水平降低（p＜0.05），MDA以及ROS水平上升（p＜0.05），线粒体膜电位红色荧光/绿色荧光值下降。在C33A细胞中转染表达HPV16circE7的质粒及pcDNA3.1(+)空载体后，采取GSH、GPx、MDA、ROS以及线粒体膜电位实验，结果显示，细胞GSH、GPx表达水平提高（p＜0.05），MDA以及ROS水平下降（p＜0.05），线粒体膜电位红色荧光/绿色荧光值上升。<br>　　结论：抑制HPV16circE7或过表达miR-214-3p可以抑制HPV16型阳性宫颈癌Caski细胞的发生和发展，HPV16circE7和miR-214-3p之间存在相互抑制关系，circE7、miR-214-3p与GPx4可能形成潜在的调控通路，影响HPV16型阳性宫颈癌细胞铁死亡的发生和发展。