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摘要口面部痛是多种炎症疾病和神经痛综合征的统称，是指与头部、面部和颈部的硬组织和软组织有关的疼痛。据报道，美国近1/4的成年人受到过口面部痛的困扰。用于治疗口面部痛的药物主要有非甾体类抗炎药（NSAIDs）、抗抑郁药、抗惊厥药以及阿片类药物等，但它们的临床应用范围受到了其副作用的严重限制。因此，临床亟需新型的高效低副作用的镇痛新药用于口面部痛的有效治疗。<br>　　孤啡肽受体（NOR）是阿片受体家族的第四个成员，在中枢和外周神经系统均有分布。现有的研究表明，NOR激动剂在炎症痛、神经痛等慢性痛中具有较好的镇痛作用，并且在非人类灵长动物中不产生成瘾、呼吸抑制和瘙痒等副作用。口面部痛往往是由口面部炎症和神经损伤导致的，因此NOR可能是口面部痛治疗的潜在靶点。<br>　　在已有的构效关系研究基础上，Chang等人利用多位点修饰的组合策略发现并报道了一类高效的肽类NOR选择性激动剂——[(pF)Phe4,Aib7,Aib11,Arg14,Lys15]N/OFQ-NH2（NOP01）。其在体内和体外实验中表现出的NOR激动活性均强于母体孤啡肽。为了进一步评价孤啡肽系统在口面部痛中的作用机制，本论文以NOR高效肽类激动剂NOP01为研究对象，系统评价了不同的注射水平下，NOP01在口面部福尔马林痛模型——一种三叉神经持续性疼痛模型中的镇痛作用，并利用药理学拮抗和免疫荧光等方法对其镇痛作用位点和作用机制进行了初步的探究。实验结果表明：中枢（鞘内）、外周（局部皮下）和系统（腹腔）三个不同水平注射NOP01在小鼠口面部福尔马林痛模型中均能产生剂量依赖的镇痛作用。进一步利用不同的受体选择性拮抗剂作为药理学研究工具研究发现：中枢和外周水平注射NOP01可通过激活NOR产生镇痛作用。并且，NOP01不通过血脑屏障，系统注射NOP01的镇痛作用是由外周NOR介导的。免疫荧光实验显示，局部皮下注射NOP01可以显著降低福尔马林所引起的同侧三叉神经节（TG）神经元中c-Fos表达的上调，即NOP01可以抑制福尔马林引起的TG神经元兴奋，这与其在口面部福尔马林痛模型中镇痛的行为学结果相一致。<br>　　近年来的研究表明：药物联用能有效降低单个药物的使用剂量，从而提高药物疗效并降低其副作用。NOR激动剂与Mu阿片受体（MOR）激动剂被证明在多种模型中具有协同的镇痛作用。为了进一步探讨NOR激动剂与MOR激动剂联用用于治疗口面部痛的可行性，本课题选用肽类分子DAMGO-NH2作为MOR激动剂，系统评价它与NOP01局部皮下共注射后的镇痛活性。实验结果显示，DAMGO-NH2在体外功能性实验（钙动员检测法）中表现为MOR受体的高效激动剂（EC50=1.39nM,Emax=102.1%），同时在口面部福尔马林痛模型中，局部皮下注射DAMGO-NH2能通过外周MOR产生剂量依赖的镇痛作用。进一步通过NOP01和DAMGO-NH2联用和等高线法计算表明，局部皮下联合注射NOP01与DAMGO-NH2在口面部福尔马林痛模型中具有协同镇痛作用。<br>　　综上所述，NOR高效肽类激动剂NOP01不通过血脑屏障，在中枢和外周水平注射均能通过NOR对口面部痛产生镇痛活性。并且，NOP01与MOR激动剂DAMGO-NH2在外周水平联用能产生协同镇痛作用。因此本论文将为口面部痛的病理学机制和相关镇痛新药研发提供了理论依据和实验支持。