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基于PI3K/AKT通路探讨消肾方改善糖尿病肾脏疾病作用机制研究

摘要目的:本研究旨在通过建立的糖尿病肾脏疾病大鼠模型,在解毒通络保肾法指导下,探讨自拟中药复方消肾方是否能通过调控PI3K/AKT通路改善糖尿病肾脏疾病作用机制研究,为临床治疗糖尿病肾脏疾病提供理论依据。<br>  方法:取200~220g健康雄性SD大鼠83只,在SPF级动物实验中心适应性饲养5天后,随机取12只正常SD大鼠作为空白对照组。将剩余SD大鼠禁食不禁水12h后,左下腹一次性注射STZ溶液60mg·kg-1制备糖尿病动物模型,30分钟内注射完毕。2周后对血糖未达标大鼠再次进行STZ溶液注射。将诱导成功的糖尿病大鼠随机平均分为模型组、氯沙坦钾对照组、消肾方高、中、低剂量组。连续灌胃治疗11周后,收集24h尿液,模型组动物尿微量蛋白明显升高,视为糖尿病肾脏疾病大鼠模型制备成功。同时检测各组大鼠体重、血糖、肾功水平、肾脏组织病理改变,并采用ELSIA法检测血清中炎症因子以及PI3K、p-AKT的表达水平,评估治疗组对糖尿病肾脏疾病大鼠疗效。<br>  结果:<br>  1模型组大鼠出现消瘦,血糖升高,尿微量蛋白、肌酐、尿素氮等肾功能改变以及光学显微镜下肾脏组织病理状态明显变化,皆证明糖尿病肾脏疾病动物模型制备成功。<br>  2体重:与模型组相比较,消肾方高剂量组显著改善了糖尿病肾脏疾病大鼠消瘦症状(P<0.01)。<br>  3血糖:与模型组相比较,治疗组血清GLU均明显降低(P<0.05)。<br>  4肾功能:与模型组相比较,消肾方高剂量组血清UA、血清CRE显著降低(P<0.01);血清BUN、尿液Ucr明显上升(P<0.05)。<br>  5病理结果:与模型组相比较,消肾方高剂量组明显改善了大鼠肾脏组织病理状态,仅有少量的肾小管上皮细胞发生水样变性。<br>  6PI3K、p-AKT蛋白含量:与模型组相比较,消肾方高剂量组大鼠PI3K、p-AKT表达显著降低(P<0.01)。<br>  7血清中细胞因子表达:与模型组相比较,消肾方高剂量组大鼠血清炎症因子TGF-β1、IL-1、IL-6、TNF-α、MCP-1表达显著降低(P<0.01)。<br>  结论:<br>  1在解毒通络保肾法的指导下创建的中药复方消肾方能有效改善糖尿病肾脏疾病大鼠的一般状态、体重、血糖、肾功能(BUN、Ucr、UA、CRE)以及光学显微镜下肾脏组织病理状态,从而达到延缓糖尿病肾脏病的发展。<br>  2中药复方消肾方能降低PI3K、p-AKT蛋白表达及相关关键的炎症表达(调节细胞生长分化的TGF-β1、抗炎症因子TNF-α、促炎症因子MCP-1、IL-1、IL-6),初步推断消肾方能通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制炎症反应,发挥对糖尿病肾脏疾病的治疗作用。<br>  3本研究证明解毒通络保肾法是治疗糖尿病肾脏疾病的有效方法,为其在临床的应用提供了实验基础和理论依据。

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