检索历史 清除

摘要帕金森疾病的发生主要与多巴胺能神经元受损和凋亡导致的多巴胺分泌不足有关。其分泌异常也会引发精神分裂症、抑郁症等相关神经系统疾病。神经干细胞移植已经成为帕金森疾病治疗研究的热点之一。然而，目前该项技术存在移植的神经干细胞分化命运不稳定、体外诱导分化效率低等难题。因此，体外高效诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元体系的建立对临床细胞移植技术的应用和发展至关重要。此外，在基础研究过程中，神经干细胞在体外经过多次传代培养后，容易出现衰老、变异基因积累等问题，需要对大量扩增的细胞进行低温保存。目前传统的10%二甲基亚砜（Dimethylsulfoxide，DMSO）冻存保护剂具有毒性高、细胞复苏率不理想等缺点。因而研发低毒性和成分明确的细胞冻存剂是十分必要的。<br>　　本研究内容主要为（1）在含少量DMSO的无血清细胞冻存保护剂中加入天然化合物表儿茶素（Epicatechin，EC）和表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechingallate，EGCG），探究其对神经干细胞冻存后存活率的影响，并进一步研究其对神经干细胞自我更新能力和多向分化潜能的影响。结果发现，5%DMSO冻存液中加入130μg/mLEC后，细胞复苏后存活率显著高于10%DMSO冻存液组（p＜0.05)，且EC成分不影响神经干细胞自身的特性。然而，EGCG成分对冻存的神经干细胞没有保护作用。（2）在含有GDNF和BDNF生长因子的培养液中加入EC和EGCG，对神经干细胞进行诱导分化。结果发现，含50μMEC的诱导体系可以显著促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化（p＜0.05)。低浓度的EGCG诱导体系可能会抑制神经干细胞的分化，而高浓度的EGCG诱导体系可能会对细胞造成损伤。<br>　　综上所述，本研究成功建立低毒性、高存活率的神经干细胞冻存体系，复苏后的神经干细胞保持自我更新能力和多向分化潜能。研究还发现，含表儿茶素成分的诱导体系能够有效促进神经干细胞分化为多巴胺能神经元。该结果为神经系统疾病的研究提供了细胞模型和理论依据，也为帕金森疾病的治疗提供了强有力的研究基础。