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摘要研究目的：年龄相关性黄斑变性（AMD）是老年人群不可逆性致盲的首要眼病，视网膜氧化损伤是其主要致病因素之一[1]。视网膜色素上皮细胞（RPE）在保护视网膜抵御氧化损伤中发挥重要作用，但其调控机制尚未完全清楚。本课题组前期研究显示Dapl1缺陷小鼠表现为年龄相关性视网膜变性及视网膜氧化损伤加重，但机制未明。本研究旨在明确小鼠RPE细胞中在体高表达DAPL1对视网膜氧化损伤的保护作用及其机制。<br>　　研究方法：本研究利用Dapl1基因敲除小鼠（Dapl1-/-）、AAV9-p.RPE65-DAPL1（AAV9-DAPL1）过表达小鼠等为主要研究对象，以小鼠腹腔注射碘酸钠为视网膜氧化损伤模型。通过视网膜组织切片HE染色，免疫荧光染色等研究手段观察小鼠视网膜氧化损伤程度。结合机制研究结果，我们利用Mitf-/-小鼠和Dct-Mitf转基因小鼠与Dapl1-/-小鼠杂交，在体研究DAPL1与MITF的遗传互作。通过WesternBlotting，蛋白免疫共沉淀（Co-IP）等技术手段阐明DAPL1调控RPE细胞抗氧化的分子机制。<br>　　研究结果：8周龄Dapl1-/-小鼠和WT小鼠在正常情况下视网膜结构无显著差异，但在碘酸钠造成的氧化损伤情况下，Dapl1-/-小鼠视网膜损伤更加严重，而通过AAV9-DAPL1介导的小鼠RPE细胞特异性高表达DAPL1可以保护视网膜抵御氧化损伤。机制研究结果显示DAPL1在RPE细胞中通过MITF调控NRF2和PGC1α的表达，继而促进RPE细胞的抗氧化功能。Dapl1-/-;Mitf+/-小鼠视网膜氧化损伤程度加剧，反之，Dapl1-/-;Dct-Mitf小鼠视网膜抗氧化能力加强。Co-IP等分子生物学研究手段揭示DAPL1通过其KPC功能域与转录因子E2F4直接结合，并以此抑制MYC的表达，并由MYC调控MITF的表达。<br>　　研究结论：本研究揭示了DAPL1是一个新的RPE细胞抗氧化调控因子，并揭示了DAPL1/E2F4-∣MYC-∣MITF→NRF2/PGC1α→RPE细胞抗氧化的调控机制。