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基于Ti3C2Tx-MXene纳米酶和3D DNA Walker的BCR/ABL融合基因检测方法研究

摘要BCR/ABL融合基因的出现是成人慢性粒细胞白血病(CML)和儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)发生的危险因素,快速检测BCR/ABL融合基因将有助于早期诊断疾病以及监测疾病的缓解。目前,现有的检测BCR/ABL融合基因的方法主要有逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术免疫表型、染色体分析、荧光原位杂交(FISH)等。然而,这些方法大多灵敏度低、成本高、耗时且需要专业人员和设备,这可能会限制其临床应用。在此背景下,电化学生物传感器由于具有灵敏度高、选择性好、响应速度快、成本低、仪器简单、易于小型化和定量能力强等突出优点,已成为临床诊断中最主要的分析工具之一。<br>  本篇研究基于Ti3C2Tx-MXene纳米酶形成的级联催化信号放大技术和3DDNAWalker,我们构建了一种高灵敏度和高选择性检测BCR/ABL融合基因的电化学生物传感器。首先,Ti3C2Tx-MXene被鉴定为一种在酚类化合物氧化中具备面积依赖性的电催化活性的高效纳米酶,Ti3C2Tx-MXene在2D平面上表现出高效且依赖于面积的苯酚吸附,这源于Ti3C2Tx-MXene薄片表面的酚羟基和氧原子之间的强吸附效应。其次,Ti3C2Tx-MXene与碱性磷酸酶(ALP)结合,以1-萘酚磷酸盐(1-NPP)为底物,构建了一种新的级联催化放大策略,从而实现了高效的电化学信号放大。最后,3DDNAWalker具有出色的有效载荷释放效率,在BCR/ABL融合基因存在的情况下可以进行DNA切割并形成大量的中间DNA(IP)片段,实现显著的信号放大。本篇研究利用这种新的级联催化扩增策略,使得此电化学生物传感器的灵敏度在0.2fM到20nM的线性范围内,检测限低至0.05fM。该传感器为慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病的早期诊断提供了一个有前景的平台。此外,Ti3C2Tx-MXene的可控催化活性为开发纳米酶开辟了道路,不仅在电化学分析领域,而且在有机合成、污染物处理等广泛领域都具有巨大的应用潜力。

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