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摘要目的：<br>　　采用网络药理学方法预测党参中主要潜在活性成分抗氧化应激的主要机制；基于Nrf2-Keap1通路，采用RAW264.7细胞考察党参药材中党参炔苷、L-色氨酸、紫丁香苷的抗氧化活性；进一步采用HPLC法测定党参炔苷、L-色氨酸、紫丁香苷的含量；并考察党参炔苷单体及党参药材提取液经不同条件（温度、受热时间、光照、pH等）处理后的稳定性，为党参药材、饮片及制剂的质量控制提供参考。<br>　　方法：<br>　　1.联合利用Pubchem和Swisstargetprediction网站查找和预测10个单体所有蛋白靶点；氧化应激相关蛋白靶点的查找则利用CTD数据库；将预测的10个单体靶点与氧化应激靶点取交集；利用STRING数据库做交集靶点的蛋白互作分析；最后对交集靶点做GO富集分析。<br>　　2.分别设置党参炔苷（100μΜ、200μM）、紫丁香苷（100μΜ、200μM）、L-色氨酸（100μΜ、200μM），采用CCK-8法检测H2O2、党参炔苷、紫丁香苷和L-色氨酸对RAW264.7细胞毒性的影响；考察党参炔苷、紫丁香苷和L-色氨酸对H2O2作用的RAW264.7细胞增殖的影响；采用MDA（丙二醛）、CAT（过氧化氢酶）、SOD（超氧化物歧化酶）、GSH-Px（谷胱甘肽过氧化氢酶）等试剂盒检测党参炔苷、紫丁香苷、L-色氨酸对H2O2作用的RAW264.7细胞抗氧化酶的影响。党参炔苷、紫丁香苷、L-色氨酸预处理RAW264.7细胞24h后，再加H2O2作用24h后通过实时荧光定量PCR（quantitativeReal-timePCR)法检测各组细胞中Keap1、Nrf2、NQO1、HO-1、GCLM、GCLC基因的表达。同法造模，Westernblot法检测Keap1、Nrf2蛋白的表达情况。<br>　　3.采用HPLC法进行方法学考察，测定党参中党参炔苷、紫丁香苷、L-色氨酸含量。<br>　　4.取党参炔苷对照品及党参药材提取液样品适量，采用HPLC方法，在不同温度、不同受热时间、不同光照、不同pH值条件下，进样测定，考察党参炔苷的稳定性。<br>　　结果：<br>　　1.10个单体共预测到214个靶点，其中CordifolioidyneA、CodonopyrrolidiumB在Pubmed中没有收载其化学式，党参苷Ⅰ在Swisstargetprediction中没有预测到靶点。党参炔苷预测到8个靶点，紫丁香苷31个，CordifolioidyneB8个，色氨酸49个，lobetyol84个，CodonopyrrolidiumA32个，lobetyolinin1个。在CTD数据库中共获得氧化应激有关蛋白靶点881个。党参10个单体预测靶点与氧化应激靶点取交集后得到33个交集蛋白靶点。STRING数据库构建33个交集靶蛋白的蛋白-蛋白相互作用网络。GO富集分析结果显示，涉及生物过程20个GO条目。<br>　　2.在党参炔苷100μM、200μM，L-色氨酸100μM、200μM，紫丁香苷100μM、200μM干预24小时后，RAW264.7细胞生长未受到显著性影响。但是，党参炔苷100μM、200μM，L-色氨酸100μM、200μM，紫丁香苷100μM、200μM预处理24小时后，均可一定程度抵抗H2O2对RAW264.7细胞的抑制，差异具有显著性，Plt;0.05。<br>　　党参炔苷100μM、200μM，L-色氨酸100μM、200μM，紫丁香苷100μM、200μM对H2O2引起的CAT、SOD、GSH-Px含量增加均有明显抑制作用，对H2O2引起的MDA含量降低也有明显的升高作用。可知，党参炔苷、L-色氨酸、紫丁香苷抗氧化应激的重要途径可能是通过对总抗氧化酶的调节来起作用的。从实时荧光定量PCR和蛋白印迹分析可得，一定浓度的党参炔苷、L-色氨酸、紫丁香苷可对抗H2O2引起的Keap1、Nrf2、NQO1、HO-1、GCLM、GCLC的mRNA表达水平升高，并可下调H2O2引起的Keap1、Nrf2蛋白上调。可知，党参抗氧化应激可能主要通过Keap1-Nrf2通路发挥作用。<br>　　3.不同批次川党参药材均检测到党参炔苷、紫丁香苷和L-色氨酸，其平均含量分别为696.41μg·g-1，7.54μg·g-1，105.26μg·g-1。<br>　　4.党参炔苷在60℃的温度下加热5h含量无明显变化;超过60℃加热时含量发生明显下降，温度对党参炔苷含量有显著影响(P＜0.05)。随加热时间的增加，党参炔苷单体及党参药材提取液中的含量呈持续降低趋势，相同条件下党参药材提取液中党参炔苷含量的变化不如对照品单体明显。光照对党参炔苷含量有显著影响(P＜0.05)。党参炔苷在实验设计的不同酸碱度溶液中稳定性良好，但pH＞12时，含量有逐渐降低趋势。<br>　　结论：<br>　　1.推测NRF2-KEAP1通路可能是党参中潜在活性成分发挥抗氧化损伤作用的重要途径。另外，通过调节免疫炎症发挥抗氧化损伤作用亦可能是党参抗氧化的重要途径。<br>　　2.党参炔苷、L-色氨酸、紫丁香苷抗氧化应激可能是通过总抗氧化酶和Keap1-Nrf2通路发挥作用的。<br>　　3.川党参中均检测出三种活性成分，含量高低依次为党参炔苷696.41μg·g-1gt;L-色氨酸105.26μg·g-1gt;紫丁香苷7.54μg·g-1。<br>　　4.党参药材的主要活性成分党参炔苷对温度及光照均较敏感，在党参药材加工处理、饮片炮制及中成药生产等过程中温度应控制在60℃以下，且不宜长时间受热处理；同时，避光条件下利于党参活性成分的保存；此外，党参炔苷溶液PH值不宜超过12。